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目的本实验拟从COX-2代谢底物花生四烯酸这一视角,阐明COX-2调控HSC细胞增殖及ACSL家族基因表达的机制。实验一方法1、利用MTT比色法检测大鼠HSC-T6细胞在花生四烯酸20μM、40μM、60μM24h、48h的增殖情况。2、利用RT-PCR检测AA20μM、AA40μM、AA60μM组时HSC的COX-2、ACSL家族基因的表达情况。结果1、花生四烯酸20μM、40μM、60μM时HSC细胞生存率增加(p<0.05),在40μM浓度下作用48h时增加显著(p<0.05)。2、COX-2基因在AA20μM、AA40μM表达增高(p<0.05),ACSL1基因在AA60μM表达相对增高(p<0.05),ACSL3、ACSL6基因在AA40μM、AA60μM表达增高(p<0.05),ACSL4、ACSL5基因在各组表达无显著变化(p>0.05)。实验二方法1、向HSC-T6转染构建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1,荧光显微镜下评估其转染效率。分组为①HSC组;②AA40μM组;③pYr-1.1HK+AA组;④COX-2shRNA1+AA组。AA组浓度为MTT筛选的最佳反应浓度40μM。2、利用MTT比色法检测转染后各组HSC细胞增殖情况。3、利用WB技术检测转染48h后各组COX-2、ACSL家族基因的表达情况。结果1、AA40μM组较HSC组OD值增加(p<0.05),COX-2shRNA1+AA组与pYr-1.1HK+AA组比较OD值降低(p<0.05),COX-2shRNA1+AA组较HSC组OD值无显著差异。2、 AA组COX-2、 ACSL1、 ACSL6基因表达较HSC组增加(p<0.05),AA+COX-2shRNA转染组较pYr-1.1HK+AA空质粒组COX-2、ACSL1、ACSL6蛋白表达降低(p<0.05),而对照组COX-2、ACSL1、ACSL6表达无显著差异(p>0.05)。结论1、COX-2可以通过代谢底物花生四烯酸促进肝星状细胞的增殖作用。2、COX-2可以通过代谢底物花生四烯酸调控HSC细胞ACSL1、ACSL6基因表达。