香蕉束顶病毒基因组Ⅰ的研究

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根据已测得的中国漳州地区香蕉束顶病毒分离物基因组1(BBTV DNA-1)的核苷酸序列,设计合成了一对引物,以中国漳州BBTV DNA-1质粒DNA为模板,利用PCR方法得到了BBTV DNA-1的编码33kDa蛋白的核苷酸片段,序列测定此片含有861个核苷酸,编码286个氨基酸.并构建了它的大肠杆菌表达载体pETRep.根据已测得BBTV DNA-1编码33kDa蛋白的编码区序列,设计一参考引物,利用PCR得到243bp的BBTV DNA-1的非编码区,以此作为BBTV DNA-1的全长启动子,并特异性地对此非编码区片段进行了5端系列缺失GA-rich、S-SL及CR-SL结构,得到三种不同长度的BBTV-DNA-1启动子片段.分别为171bp、119bp、80bp.利用pBI221、pBI121分别构建了以上四个启动子的植物瞬间和稳定表达载体.利5-RACE确定漳州BBTV DNA-1的转录超始位点.
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