【摘 要】
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该论文分两部分:第一部分研究了胰岛素和类胰岛素生长因子-1(IGF-1)不同折叠行为的序列基础.第二部分研究了文昌鱼类胰岛素肽(AILP)的氧化折叠和还原解折叠途径.第一部分:胰
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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该论文分两部分:第一部分研究了胰岛素和类胰岛素生长因子-1(IGF-1)不同折叠行为的序列基础.第二部分研究了文昌鱼类胰岛素肽(AILP)的氧化折叠和还原解折叠途径.第一部分:胰岛素折叠为一种热力学稳定的二硫键配对结构;而IGF-1却折叠为两种热力学稳定的二硫键配对结构,天然(native)的和错配(swap)的.该题通过把mini-IGF-1和重组猪胰岛素前体(PIP)的N端部分序列互换,用蛋白质工程的方法构建了4个模型肽:[1-9]PIP,[1-10]mini-IGF-1,[1-4]PIP及[1-5]mini-IGF-1.只有[1-9]PIP折叠为两种热力学稳定的二硫键配对结构.而[1-10]mini-IGF-1,[1-4]PIP及[1-5]mini-IGF-1只折叠为一种稳定的结构.该文说明胰岛素/IGF-1的B-链/结构域1-9/1-10序列决定了它们不同的折叠行为,并对可能机制进行了讨论.第二部分:在AILP氧化折叠过程中,除了错配AILP中间体外,还捕获了四个主要中间体,P1,P2,P3及P4,这些中间体与还原解折叠过程中捕获到的中间体U1,U2,U3及U4完全相同.P4(U4)为含有天然二硫键A20-B19的单二硫键中间体,P1(U1),P2(U2),P3(U3)为含有A20-B19的双二硫键中间体.该文绘出了AILP的主要氧化折叠和还原解折叠途径草图.并提出胰岛素家族成员折叠行为特点:(1)A20-B19二硫键是在折叠起始阶段形成的最为重要的二硫键;(2)第二对二硫键的形成比较随机;(3)体外折叠/解折叠通过类似但相反的途径.此外该文提示错配AILP在折叠过程中除了作为热力学稳定的折叠终产物外,还作为生产性中间体存在,这种行为介于错配胰岛素和错配IGF-1之间.
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