论文部分内容阅读
目的：通过观察肺肠合治法对支气管哮喘大鼠肺组织中VIP，AQP3的影响，探寻肺肠合治法治疗支气管哮喘的分子机制。 方法：随机选择健康成年雄性SD大鼠50只，设空白组10只，造模组40只，采用鸡卵清蛋白（OVA）与氢氧化铝的混合溶液分别在第1天，第8天进行腹腔注射致敏，在第15天连续雾化吸入2周复制大鼠慢性支气管哮喘模型。模型制备成功后将雄性SD大鼠分为4组（模型组、治肺组、治肠组和肺肠合治组）各10只，空白组和模型组给予生理盐水灌胃，治肺组、治肠组、肺肠合治组分别给予体现治肺的三拗汤、治肠的小承气汤、肺肠合治的（三拗汤+小承气汤）水煎剂灌胃，连续给药4周。造模和治疗期间观察记录大鼠的体重和粪便，治疗结束后进行标本采集，ELISA法检测血清IL-18、lgE含量，免疫荧光法检测肺组织VIP、AQP3蛋白的表达水平，Q-PCR法检测肺组织VIPmRNA、AQP3mRNA的表达，Masson染色法观察肺部气道组织病理改变。 结果：（1）一般状态：与空白组比较，模型组大鼠出现倦卧、喜扎堆、呼吸喘促急迫，体重增加幅度小，大便逐渐干硬、排便量变少；与模型组比较，肺肠合治组大鼠一般状态在治疗2周后均有明显缓解，在治疗4周后粪便、体重趋于正常，在肺部表现的呼吸喘促等症状趋于平稳，治肺组、治肠组大鼠在治疗2周后在肺部表现的呼吸喘促和肠部表现的体重和粪便量等症状均有所缓解，在治疗4周后出现明显的改善。（2）大鼠体重：与空白组比较，模型组大鼠体重增长明显减缓（p＜0.01）；与模型组比较，治疗组大鼠在治疗4周内体重增长明显加快（p＜0.05），且肺肠合治组高于其他两组。（3）大鼠粪便量：和空白组比较，模型组大鼠粪便量明显减少（p＜0.01），治疗组和模型组比较，粪便量在治疗4周内明显增多（p＜0.05）。（4）血清lgE：与空白组相比，模型组相大鼠血清lgE含量明显升高（p＜0.01）；与模型组比较，肺肠合治组、治肺组大鼠血清lgE含量显著降低（p＜0.01），治肠组可一定程度降低血清lgE含量，且具有差异（p＜0.05）（5）血清IL-18含量：与空白组比较，模型组大鼠血清IL-18含量显著降低（p＜0.01）；与模型组比较，治疗组可显著降低血清IL-18含量（p＜0.05）（6）肺组织AQP3mRNA表达量：与空白组比较，模型组大鼠肺组织AQP3mRNA的表达量显著增强，具有差异（p＜0.01）；与模型组比较，肺肠合治组大鼠肺组织AQP3mRNA表达量明显降低（p＜0.01），治肺组、治肠组可不同程度的降低（p＜0.05）。（7）肺组织VIPmRNA表达:与空白组比较，模型组大鼠肺组织VIPmRNA的表达显量著量性降低，具有差异（p＜0.01）；与模型组比较，肺肠合治组大鼠肺组织VIPmRNA表达量明显升高（p＜0.01），治肺组、治肠组大鼠VIPmRNA量有不同程度的增高（p＜0.05）（8）肺组织AQP3蛋白表达：与空白组比较，模型组大鼠肺组织AQP3蛋白表达部位明显增多，表达强度逐渐增强；与模型组比较,肺肠合治组大鼠肺组织AQP3蛋白表达部位明显减少，表达强度减弱，治肺组、治肠组AQP3蛋白表达有不同程度的减弱。(9)肺组织VIP蛋白表达:与空白组比较，模型组大鼠肺组织VIP蛋白表达部位明显减少，表达强度减弱；与模型组比较，肺肠合治组大鼠肺组织VIP蛋白表达部位明显增多，表达强度增强，治肺组、治肠组有所促进VIP蛋白表达部位的增多。(10)Masson染色结果：与空白组比较，模型组大鼠气道上皮及上皮下层可见大量蓝染的纤维组织，气道增生明显，气道重塑形成；肺肠合治组大鼠气道纤维化明显减轻，气道逐渐恢复正常；治肺、治肠组气道蓝染纤维组织较少，一定程度上改善了肺部气道纤维组织的形成。 结论：1.肺肠合治法可以改善因支气管哮喘造模所致的大鼠粪便、体重异常，改善肠道功能，促进肠道蠕动以改善支气管哮喘的呼吸功能。 2.肺肠合治法可以明显降低血浆IgE、IL-18含量水平，参与免疫调节、抑制变态反应、减缓气道炎症的发展。 3.肺肠合治法（三拗汤+小承气汤）可以减弱支气管哮喘大鼠肺组织中AQP3的表达，增强肺组织VIP的表达参与免疫调节、抑制炎性介质的释放来治疗支气管哮喘，其治疗支气管哮喘的分子机制可能与调节VIP、AQP3的表达密切相关。 4.VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路是肺肠合治法治疗支气管哮喘的可能机制之一。