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目的:肾癌,占肾脏恶性肿瘤的80%～90%,其中肾透明细胞癌是肾癌最主要以及最常见的组织学类型。肾透明细胞癌是目前最耐药的癌症之一,对放化疗均不敏感,尤其是晚期肾透明细胞癌易发生侵袭和转移,预后不佳,因此对其的诊断与治疗是一项具有挑战性的任务。了解肾透明细胞癌的发病及发展机制可能会改善当前的诊断、治疗和预后。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的不编码蛋白的RNA分子,但具有mRNA样结构,通常在表观遗传调控等形式上调控基因的表达水平。近年来在多种癌症中,证实了其在肿瘤发生、发展中起到重要的作用。lncGABPB1-AS1是GABPB1的反义RNA,参与细胞的氧化应激反应,有文献报道其在肝癌中具有抑癌的作用,但其发挥功能的机制仍不清楚。为了明确lncGABPB1-AS1在肾细胞癌中的作用及其机制,为肾癌的靶向治疗寻求新的靶点,我们进行了相关研究。研究方法:1.通过RT-PCR方法检测48对新鲜冰冻肾透明细胞癌组织、正常肾皮质组织及体外培养的肾癌细胞系和正常肾细胞系中lncGABPB1-AS1的表达;分析lncGABPB1-AS1表达水平与临床病理指标的相关性;构建lncGABPB1-AS1全长表达载体并转染肾癌细胞系786-O,caki-1;通过CCK-8实验以及裸鼠皮下成瘤实验观察过表达lncGABPB1-AS1前后肾癌细胞在体内和体外增殖能力的变化,利用Transwell检测过表达lncGABPB1-AS1前后肾癌细胞迁移、侵袭能力的变化。2.通过生物学网站预测具有lncGABPB1-AS1结合位点的miRNA以及miRNA下游的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证其之间的靶向关系;通过RT-PCR方法检测过表达lncGABPB1-AS1后miR-1246的表达变化;利用RT-PCR方法和western blot方法检测过表达miR-1246前后PCK1的表达变化及同时过表达miR-1246和lncGABPB1-AS1后PCK1的表达;CCK8实验、transwell实验检测单纯过表达lncGABPB1-AS1及同时过表达lncGABPB1-AS1并沉默PCK1后肾癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化;免疫组化染色检测肾癌组织及正常肾皮质组织中PCK1的相对表达量,western blot方法检测肾癌细胞及正常肾小管上皮细胞中PCK1的表达情况。结果:lncGABPB1-AS1在肾癌组织以及肾癌细胞中均呈低表达,lncGABPB1-AS1表达量与肿瘤大小,TNM分期及Fuhrman分级呈负相关;转染lncGABPB1-AS1载体后,肾癌细胞高表达lncGABPB1-AS1;过表达lncGABPB1-AS1后,肾癌细胞增殖、迁移、侵袭能力降低。双荧光素酶验证基因证明lncGABPB1-AS1与miR-1246能够靶向结合;miR-1246与PCK1能够靶向结合;过表达lncGABPB1-AS1后,miR-1246表达水平下降,两者表达量呈负相关;过表达miR-1246后,PCK1的RNA表达量下降,两者表达量呈负相关;western blot实验结果显示miR-1246过表达后PCK1蛋白表达量明显下降,同时过表达miR-1246与lncGABPB1-AS1后PCK1蛋白表达量与对照组相比差异不显著;肾癌细胞及肾癌组织中PCK1表达量相对较低;下调PCK1的蛋白表达后,过表达lncGABPB1-AS1的肾癌细胞增殖、迁移及侵袭的能力上升。结论:1.lncGABPB1-AS1在肾透明细胞癌组织及细胞株中的表达量明显低于正常肾皮质组织及正常肾小管上皮细胞;lncGABPB1-AS1表达量与TNM分期、肿瘤大小、Fuhrman分级均呈负相关;lncGABPB-1可抑制肾癌细胞的增殖、迁移及侵袭,并抑制异种移植小鼠皮下成瘤能力。2.在肾癌细胞中,lncGABPB1-AS1通过miR-1246/PCK1调控轴,发挥抑制肾癌细胞的增殖、迁移及侵袭的作用。