一株辛基酚聚氧乙烯醚高效降解菌的筛选、鉴定及其降解研究

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辛基酚聚氧乙烯醚(Octylphenol polyoxyethylenes, OPnEO)作为一种性能优良的非离子表面活性剂,被广泛用于洗涤、纺织、皮革、造纸、农药等领域。由于辛基酚聚氧乙烯醚及其中间代谢产物具有难降解、疏水性、脂溶性和生物累积性等特性,大量使用必然会产生环境污染问题。OPnEO污染的治理方法有物理法、化学法、物理化学法和生物降解法等,其中生物降解法由于处理效果好、费用少和无二次污染等优点,得到了广泛的关注。由此,本文在筛选获得一株能够降解高浓度辛基酚聚氧乙烯醚降解菌H1的基础上,进一步对降解菌进行了系统发育等鉴定,并对该菌的抗生素耐药性、重金属铬抗性、降解底物广谱性和降解特性进行了研究。此外,通过液相色谱-质谱(LC-MS)对降解菌H1降解OPnEO的降解产物进行了检测和分析,对降解机理和途径进行了初步研究和推测。主要结论如下:(1)高效降解菌H1的筛选和鉴定。采用TX-100(OPnEO,n=9-10)为唯一碳源的无机盐培养基进行筛选,经过富集、分离和纯化获得了一株能够耐高浓度TX-100且降解性能较好的降解菌,命名为H1。采用逐步提高TX-100浓度的方法驯化降解菌H1,使其能够在含3g/L TX-100的无机盐平板上正常生长。对细菌H1进行形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA(GenBank Accession No.KC505179)序列相似性分析,初步鉴定为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus),为降解TX-100的一个新种。药敏实验结果表明该菌对多种抗生素具有耐药性。同时,还发现菌株H1对重金属铬具有一定的耐受性。(2) OPnEO的降解途径研究。利用不同培养基研究了菌株生长曲线,并对TX-100的降解产物进行了检测,发现了降解过程中有C2H203和OP4EC产生,初步推测OPnEO的降解模式为末端氧化,先从EO末端氧化,醚键断裂,形成短链的化合物,同时释放出乙醛酸。(3)菌株H1的降解底物广谱性研究。检测发现降解菌H1能在高浓度SDS环境中生长,降解特性研究结果表明该菌利用SDS的最适温度为30℃,最适pH为7.0,最适接种量为2%,并适应低渗透压环境。当SDS浓度低于400mg/L时,菌株H1对SDS的降解率在85%以上,且在SDS浓度为400mg/L时,达到最大降解率94%。当K2Cr207为500mg/L时,菌株H1对SDS的降解率仍达到50%左右。添加酵母浸出物可促进SDS的降解,添加一定量的TX-100对菌株H1生长和降解SDS影响较小,但对TX-100降解影响较大。(4)菌株H1的降解成因分析。质粒检测结果表明,菌株H1含多条质粒DNA条带,可能有多个质粒。对原始株和质粒消除后的衍生株进行研究发现,表面活性剂TX-100和SDS的降解与菌株H1的质粒有关,而且对氨苄西林、阿米卡星和复方新诺明的耐药性也与质粒有关。
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