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目的:建立体外脐带血单个核细胞来源与健康成人外周血单个核细胞来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)诱导培养体系,比较这两种来源的CIK细胞体外增殖速度,相关细胞表型的表达水平以及对肺癌A549细胞杀伤能力。 方法:无菌条件下采用密度梯度离心法分别从脐带血与健康成人外周血中分离获得单个核细胞,用γ-干扰素(IFN-γ)、重组人IL-2、重组人IL-1a、CD3单克隆抗体(OKT3)等细胞因子诱导扩增CIK;分别于培养的第4、7、10、14天采用直接细胞计数法比较两种来源CIK的增殖速度;于体外培养的14天采用流式细胞仪分别检测两种来源CIK的细胞表型;MTT法比较同种来源的CIK在不同效-靶比下的杀伤作用和2种来源的CIK在相同效-靶比下对肺癌A549细胞的杀伤作用。 结果:(1)脐带血单个核细胞来源的CIK增殖速率明显高于健康成人外周血单个核细胞来源CIK(P<0.05); (2)2种不同来源单个核细胞经14天诱导后,流式细胞仪分析CIK,其细胞表面表达CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD56+表型细胞所占百分均显著提高;脐带血单个核细胞来源的CIK细胞表型CD3+(92.49±2.23%)、CD3+CD8+(65.1+3.94%)和CD3+CD56+(52.7±2.09%);来源于健康成人外周血单个核细胞的CIK免疫细胞表面标志CD3+(70+7.31%)、CD3+CD8+(34.2+6.79%)和CD3+CD56+(28.05+4.31%),两者各组间均存在显著差异(P<0.05),说明脐带血单个核细胞来源的CIK含有的免疫杀伤效应细胞和细胞毒细胞比例更高。 (3)MTT法比较CIK细胞对肺癌A549细胞株杀伤活性:同种来源的CIK杀伤作用随着效-靶比升高而增强(P<0.05),不同来源的CIK在同一效-靶比下脐带血单个核细胞来源CIK的杀伤作用显著高于健康成人外周血单个核细胞来源的CIK(P<0.05)。 结论:体外培养的脐带血单个核细胞来源的CIK较健康成人外周血单个核细胞来源的CIK细胞培养增殖速度快,CD3+、CD3+CD8+和CD3+CD56+细胞比例高(P<0.05),对肿瘤细胞的杀伤活性更强(P<0.05)。同种来源的CIK的杀伤活性呈数量依赖性,效-靶比越高,杀伤力越强(P<0.05)。