背景和目的：　　 树突状细胞(Dendritic cell,DC)是迄今为止已知的功能最为强大的专职抗原提呈细胞(Antigen presenting cell,APC),DC不仅可以通过抗原特异的形式诱导T细胞去识别并杀伤肿瘤细胞,还可以激发免疫记忆,在机体再次受到肿瘤细胞攻击时发挥有效的保护作用。因此,通过对DC的应用可以使肿瘤的免疫治疗更加有效。　　 DC在抗肿瘤治疗中理论上已具有了突出的优势,但在肿瘤患者体内,如何提高DC数量、激活DC并使之发挥强大的抗原提呈作用已经成为目前肿瘤免疫治疗研究的热点。通过应用多糖增强DC的功能和机体的免疫功能来治疗肿瘤是目前正在研究的一种新方法。多糖具有免疫活性强,毒副作用小的特点,把其作为一种生物反应的重要调节剂已经成为此领域关注的焦点。　　 牛膝多糖(Achyranthes bidentata polysaccharides,ABPS)是从牛膝(Achyranthes bidentata blume)根中分离获得的一种水溶性小分子多糖化合物。研究报道提示牛膝多糖能够诱导单核细胞表达TNF-α、IL-6和IL-4。锌对于免疫系统的形成、稳定调节和维持机体的正常免疫功能等方面都有着重要作用,对多种细胞因子的分泌和活性具有调节作用,如IL-1、IL-2、IL-4、IL-6等。　　 本实验旨在研究牛膝多糖、锌单用与合用在异源性抗原负载的条件下对小鼠树突状细胞(DC)增殖分化和抗原提呈能力的影响,并通过体内实验证实其对荷瘤小鼠的免疫效应,探讨其发生机制。　　 实验方法：　　 1.体外实验:无菌条件下处死正常小鼠获取其骨髓细胞,应用粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导骨髓细胞生成DC,同时在培养液中加入不同浓度的牛膝多糖(200、300、400μg/ml)、锌(0.02μg/ml)、联合用药组(牛膝多糖300μg/ml+锌0.02μg/ml),并设生理盐水对照组,于第5d用EC9706冻融抗原冲击致敏DCs,培养至第8d收集各组DC。通过应用倒置显微镜观察DC的形态变化；应用流式细胞术检测DC表面标志CD86、CD11a的表达情况；应用流式细胞术检测DC、T细胞增殖效应,以及T细胞对EC9706的杀伤活性。　　 2.体内实验:制备荷H22肝癌小鼠,24h后应用不同浓度的牛膝多糖(500、1000、2000μg/ml)、锌(20μg/ml)、联合用药组(牛膝多糖1000μg/ml+锌20　　 μg/ml),左下腹腔注射,并设生理盐水对照组,连续注射药物7d,于第9d处死各组小鼠,观察药物对H22荷瘤小鼠的脾指数、胸腺指数以及肿瘤抑制率的影响。　　 3.采用统计软件包SPSS10.0进行统计学数据分析,结果用(x)±s表示,多个样本均数之间采用单因素方差分析的方法,显著性水准为p<0.05。　　 实验结果：　　 1.牛膝多糖中剂量组、锌组、合用组DC培养至第5d,出现典型的非成熟树突状细胞形态；用冻融抗原冲击后培养至第8d,树突状细胞突起减少,由贴壁、半悬浮状态变为悬浮状态,细胞变大变圆,均匀散布于培养基中。这些改变均比牛膝多糖低剂量组和生理盐水对照组明显。　　 2.牛膝多糖和锌在异源性抗原负载时对DC表面CD86的表达:牛膝多糖中剂量组(16.72±0.35)、锌单独作用组(18.22±0.39)以及联合用药组(16.14±0.48)明显高于生理盐水对照组(9.71±0.16)(P<0.05),牛膝多糖高剂量组(3.1±0.66)明显低于其它组(P<0.05)；CD11a的表达:牛膝多糖中剂量组(67.03±0.24)明显高于其它组(P<0.05),高剂量组(4.92±0.54)明显低于其它组(P<0.05)。　　 3.牛膝多糖中剂量组的DC的增殖指数(36.89±0.62％)明显高于其它对照组(p<0.05),牛膝多糖高剂量组(8.3±0.74％)明显低于其它对照组(p<0.05)。　　 4.牛膝多糖中剂量组和锌单独作用组DC致敏的T细胞的增殖指数(70.22±0.54％、58.64±0.23％)明显高于其它对照组(p<0.05),两组之间也有显著性差异(p<0.05)；牛膝多糖高剂量组(18.39±0.26％)明显低于其它对照组(p<0.05)。　　 5.牛膝多糖中剂量组、锌单独及联合用药组DC诱导的CTL杀伤活性明显高于生理盐水对照组(P<0.05),牛膝多糖中剂量组(58.89±0.27％)明显高于其它组(P<0.05),牛膝多糖高剂量组(25.80±0.62％)明显低于其它组(P<0.05)。　　 6.牛膝多糖中剂量组、锌单独作用组及联合应用组的胸腺指数及脾指数都明显高于生理盐水对照组(P<0.05)；牛膝多糖中剂量组的抑瘤率(47.19％)明显高于其它组(P<0.05),牛膝多糖高剂量组(14.39％)明显低于其它组(P<0.05)。　　 结论：　　 1.牛膝多糖、锌在异源性抗原负载的条件下能够促进小鼠髓源性树突状细胞的增殖分化和抗原提呈,牛膝多糖存在量效关系；　　 2.牛膝多糖、锌对荷瘤小鼠免疫功能有正性调节作用,可抑制机体肿瘤的生长；　　 3.牛膝多糖和锌合用时两者不仅无叠加效应,反而使正性免疫调节作用较牛膝多糖最适剂量降低:超过一定剂量的牛膝多糖抑制小鼠免疫功能。