复方卡波姆构建大鼠慢性高眼压模型的研究

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目的通过对SD大鼠前房注射0.5%复方卡波姆混悬液构建稳定可重复且廉价的大鼠高眼压青光眼模型,观察卡波姆对眼压的升压效果和不同时长高眼压作用下的大鼠眼前节、视网膜的形态学改变以及视网膜电图的改变。方法选取40只体重在250-300g SD大鼠(雌雄各半),右眼定为实验眼,左眼为正常对照。术前3天每天早晚测基础眼压。腹腔麻醉后,将30μl 0.5%卡波姆混悬液注射入前房。每日早晚10时测眼压,术后每隔7天选取10只大鼠行眼前节照相后,选取瞳孔区无卡波姆遮挡的大鼠行ERG检查,然后处死。取眼球后于多聚甲醛溶液中固定,石蜡包埋,HE染色观察视网膜各部位形态变化,Tunel染色观察视网膜各层细胞凋亡。结果注射前,大鼠实验眼白天和夜间眼压分别为11.10±0.90mmHg和11.92±1.07mmHg。对照眼白天和夜间眼压分别为11.22±1.07mmHg和11.76±1.08mmHg,白天和夜间大鼠实验眼和对照眼眼压之间均无统计学差异(均为P>0.05)。术后部分大鼠眼压维持在20mmHg以上持续4周。术后夜间实验眼与对照眼眼压,从注射后第一天到27天,差异有统计学意义(p<0.05),术后28天实验眼与对照眼差异无统计学意义。注射后第1天至27天实验眼与对照眼夜间眼压的平均值有统计学意义(P<0.05)。术后实验眼白天与对照眼白天眼压对比,第6、7、8、9、10、12、14、16和19天,两者之间差异具有统计学意义(p<0.05)。实验眼视网膜各层形态均发生改变,视网膜全层厚度减少,内丛状层(IPL)厚度减少,神经节细胞个数明显减少。卡波姆及虹膜的混合成分紧贴角膜内皮并延伸至房角,堵塞小梁网结构。与对照眼相比,实验眼眼压维持2周、3周和4周的老鼠视网膜厚度逐渐变薄。2周后处死固定的眼球,行ERG发现,视杆细胞反应Rod,暗适应眼最大混合反应Max,振荡电位反应OPs、视锥细胞反应Cone等与对照眼相比明显,有明显的统计学意义,(均为P<0.01)。Tunel染色神经节细胞层在1周时出现阳性细胞,并在2、3、4周神经节细胞层均有阳性细胞出现。结论前房注射卡波姆建立大鼠高眼压模型,可维持中度升压效果4周以上,白天和夜间升压差异较为明显,表现为夜间眼压较白天更高,昼夜眼压波动维持1周后即可出现神经节细胞凋亡,视网膜2周后即可出现形态学损伤的表现。
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