论文部分内容阅读
目的:研究电针对快速老化模型SAMP8小鼠大脑皮质区炎性细胞因子及其认知功能的影响,从炎性反应的角度讨论电针改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)认知功能的影响并探讨其作用机理,为针刺治疗AD提供理论指导。材料与方法:选用7月龄雄性同一种系快速老化模型SAMP8小鼠及抗快速老化模型SAMR1小鼠,将SAMP8小鼠随机分为模型组、电针组、西药组,每组6只;将SAMR1小鼠作为对照组,每组6只,所有小鼠分笼饲养。电针组针刺“百会”、双侧“肾俞”和双侧“三阴交”,电针仪选用连续波,频率为2 Hz,电流0.6 m A,持续20 min,同时灌胃与西药相同体积的蒸馏水;西药组按照3 mg/kg/d灌胃盐酸多?哌齐且同种程度抓取固定小鼠一次;模型组、对照组每天同一时间灌胃同体积的蒸馏水且同种程度抓取固定小鼠一次。6 d一个疗程,共治疗4个疗程。采用Morris水迷宫观察小鼠行为学的变化;采用免疫组化法和Western Blot法检测星形胶质细胞GFAP和小胶质细胞Iba1的分布和表达。采用免疫组化法、Western Blot和ELISA法检测炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的分布和表达。结果:1.电针对SAMP8小鼠学习认知能力的影响:在定位航行实验中,与对照组相比,模型组逃避潜伏期和游泳路程明显增加(P<0.05);与模型组相比,电针组及西药组逃避潜伏期及游泳路程显著缩短(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。在空间探索实验中,与对照组相比,模型组小鼠的跨越平台次数及目标象限搜索时间明显减少(P<0.05);与模型组相比,电针组及西药组跨越平台次数及目标象限搜索时间明显增加(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。2.电针对SAMP8小鼠大脑皮质GFAP表达的影响:Western Blot法检测结果显示:与对照组相比,模型组皮质区GFAP蛋白含量表达升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组GFAP蛋白含量表达下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。3.电针对SAMP8小鼠大脑皮质Iba1表达的影响:⑴免疫组化结果显示:与对照组相比较,模型组皮质区Iba1阳性细胞数量及平均光密度值明显上升(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组数量及平均光密度值显著降低(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。⑵Western Blot法检测结果显示:与对照组相比,模型组皮质区Iba1蛋白含量表达升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组Iba1蛋白含量表达下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。4.补肾活血电针对SAMP8小鼠大脑皮质IL-1β表达的影响:⑴免疫组化结果显示:与对照组比较,模型组皮质区IL-1β阳性细胞数量及平均光密度值明显上升(P<0.05);与模型组比较,电针组和西药组阳性细胞数量及平均光密度值明显下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。⑵Western Blot法检测结果显示:与对照组比较,模型组皮质区IL-1β蛋白含量表达升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和西药组IL-1β蛋白含量表达下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。5.电针对SAMP8小鼠大脑皮质TNF-α表达的影响:⑴免疫组化结果显示:与对照组相比较,模型组皮质区TNF-α阳性细胞数量及平均光密度值显著上升(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组阳性细胞数量与平均光密度值显著下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。⑵Western Blot法检测结果显示:与对照组相比,模型组皮质区TNF-α蛋白含量表达升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组TNF-α蛋白含量表达降低(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。⑶ELISA法检测结果显示:与对照组相比,模型组皮质区TNF-α含量升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组TNF-α含量下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。6.电针对SAMP8小鼠大脑皮质IL-6表达的影响:在ELISA法检测结果中,与对照组相比,模型组皮质区IL-6含量升高(P<0.05);与模型组相比较,电针组和西药组IL-6含量下降(P<0.05);电针组与西药组相比,无统计学意义(P>0.05)。结论:1.快速老化模型小鼠大脑皮质内胶质细胞GFAP、Iba1及炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达升高,提示在AD的发生发展过程中免疫炎性反应起到重要作用;2.电针“百会”、“肾俞”、“三阴交”可以有效改善SAMP8小鼠的学习及记忆能力;3.电针“百会”、“肾俞”、“三阴交”能够通过抑制胶质细胞的增生活化及抑制免疫炎性反应从而改善SAMP8小鼠的学习及记忆能力。