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目前在研究肺表面活性物质(Pulmonary Surfactant,PS)与PS相关疾病关系时,一般认为在疾病状态下存在PS量或结构异常,妨碍PS的磷脂在气液界面上形成单分子层,使PS表面活性下降。但体外许多实验却提示PS磷脂在气液界面上呈多层分子分布。因此,若能明确PS在肺泡气液界面上分布情况,将对研究PS相关疾病很有价值。本实验采用PS复合固定法,观察不同呼吸状态下正常以及哮喘豚鼠肺泡衬里层肺表面活性膜超微结构特点,旨在探讨PS结构与功能关系,并重新评价钌红在显示PS超微结构中的地位。实验结果如下:①肺泡衬里层由表面活性膜和下相构成;表面活性膜可表现为单层、双层或多层嗜锇膜、单层囊泡、双层囊泡、多层囊泡、管状髓磷脂结构、板层体、多层嗜锇膜+多层囊泡、多层嗜锇膜+单层囊泡等;在肺泡壁相对平坦部位,表面活性膜多由单层、双层嗜锇膜或囊泡样结构组成,而在肺泡角、肺泡裂等部位还可出现板层体、管状髓磷脂结构、分层嗜锇膜+多层囊泡等结构;不同PS结构在局部表面活性膜中排列有一定顺序:从气相至液相,按表面活性由大到小排列;当肺泡处于萎陷或呼气状态时,单位肺泡内表面活性膜中的板层体、管状髓磷脂结构和多层囊泡个数总和明显增多,而当肺泡处于吸气状态时则相反,两者比较差异非常显著(P<0.01)。②在肺泡同处于萎陷状态下,哮喘豚鼠与正常豚鼠相比较,单位肺泡内板层体、管状髓磷脂结构和多层囊泡的个数总和明显减少,两者之间差异非常显著(P<0.01);哮喘时出现异常PS结构,以及肺泡腔内巨噬细胞易见,其吞饮体内可见残存的PS结构。③锇酸钌红复合染色,显示肺泡衬里层为一厚度不均呈絮状或绒毛状的高电子密度影,分不清表面活性膜和下相;在毛细血管内皮面和红细胞表面也可见相似的结构。 结论:(1)肺表面活性膜是由多层分子组成的,当表面活性膜被压缩时,表面活性膜中表面活性较大的PS结构总数增多,而在扩张时,其表面活性较大的PS结构总数减少,提示在呼气和吸气过程中表面活性较大与较小PS结构之间可以相互转化;(2)哮喘时表面活性较大PS结构数目减少且出现异常PS超微结构,使PS表面活性下降;(3)钌红复合染色不能很好显示PS超微结构。