NT4-GFP转基因骨髓基质干细胞脑内移植对AD大鼠行为学及P50的影响

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目的 观察NT4基因修饰的骨髓基质干细胞移植入AD大鼠模型脑内后在行为学、电生理方面和形态学上的变化。 方法 30只雌性SD大鼠随机分为5组:正常组、AD模型组、DMEM移植组、MSCs移植组和MSCs-NT4移植组。采用双侧切段穹隆海马伞的方法制备AD大鼠模型。术后10天将MSCs、MSCs-NT4分别移植入AD大鼠的海马内。移植后一个月后进行行为学测试。行为学测试结束后进行电生理检测。检测完毕后取脑,对海马组织切片行胆碱乙酰化酶(CHAT)免疫组织化学两步法染色,对海马恒定视野内的ChAT阳性细胞进行计数分析。并用免疫组织化学两步法检测NT4基因在海马中的表达。 结果 1、行为学(Morrise水迷宫):AD组的平均潜伏逃避期与正常组相比显著延长(P<0.01)。MSCs移植组、MSCs-NT4移植组的平均潜伏逃避期均较AD组明显缩短(P<0.01),MSCs-NT4移植组的平均潜伏逃避期短于MSC移植组(P<0.05);DMEM移植组与AD组比较没有明显的变化(P>0.05)。2、神经电生理P50:AD组与正常组比较,C-P50、T-P50的波幅明显降低,抑制明显减弱;而移植后,MSCs移植组、MSCs-NT4移植组的P50较AD组有明显改善(P<0.01),波幅明显增高,抑制明显增强;MSCs-NT4移植组与MSCs移植组比较有差异性(P<0.05),MSCs-NT4移植组作用较明显;DMEM移植组与AD组比较没有差异性(P>0.05)。3、移植后MSCs-NT4可在体内稳定表达NT4。4、免疫组织化学:AD组与正常组相比,ChAT阳性细胞数明显减少(P<0.01);移植后,MSCs移植组、MSCs-NT4移植组与AD组比较,ChAT阳性细胞数明显增多(P<0.01);MSCs-NT4移植组与MSCs移植组比较,ChAT阳性细胞数明显增多,染色强度增强;DMEM移植组与AD组比较没有明显变化(P>0.05)。
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