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目的:探讨神经降压素(neurotensin,NTS)与肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵袭性和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系及其相关分子机制。方法:随机选取100例经部分肝切除术治疗的HCC患者石蜡组织切片标本,同时收集患者的临床病理资料。利用免疫组化方法分别检测NTS,Ki67,E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Vimentin等EMT指标的表达,并分析NTS与临床病理指标的相关性。以Hep3B、Hep G2为基础,通过基因转染技术和RNA干扰技术构建不同NTR1表达水平的HCC细胞系。利用Brd U增殖实验、MTT法、Annexin V凋亡实验、划痕修复实验、Transwell侵袭实验来观察不同NTS处理和不同NTR1表达水平的细胞在增殖、凋亡、迁移、侵袭上的差异。通过Real-time PCR和Western Blot的方法分析不同处理组之间EMT相关指标(E-cadherin、β-catenin、N-cadherin、Snail、Slug)表达水平上的差异。利用PCR芯片技术和Western Blot探究NTS调控肝癌细胞EMT的主要信号通路和分子机制。通过SR48692和TSW119分别阻断NTS信号通路和经典Wnt通路来观察肝癌细胞EMT指标和侵袭能力的变化。结果:HCC标本中,NTS+标本占19.00%,NTS表达与HCC患者包膜完整性和门静脉癌栓侵润等转移相关指标密切相关。并且NTS+HCC患者预后不良,其OS明显短于NTS-HCC患者,NTS是影响HCC患者不良预后的独立因素。NTS+标本中E-cadeherin表达减少,β-catenin在细胞浆内聚积,N-cadherin表达增多。NTS的表达水平与E-cadeherin的表达水平呈负相关,与β-catenin和N-cadherin的表达水平呈正相关。外源性NTS刺激和高表达NTR1对Hep3B和Hep G2细胞的增殖与凋亡无影响,但可以显著提高其划痕修复率和侵袭细胞数。同时外源性NTS刺激和高表达NTR1可以促进HCC细胞EMT,表现为降低Hep3B和Hep G2细胞中E-cadeherin表达,提高β-catenin、N-cadherin和Snail的表达。给予外源性NTS和提高NTR1表达量可以提高Wnt/β-catenin通路中Wnt1、Wnt3、Wnt5、Axin、p-GSK3β以及β-catenin的表达。SR48692和TSW119阻断可以逆转EMT过程造成E-cadeherin表达升高,β-catenin和N-cadherin表达降低,同时降低Wnt通路中的Wnt3、Axin、p-GSK3β以及β-catenin表达以及HCC细胞的迁移和侵袭力。结论:HCC组织中NTS高表达与肝癌高侵袭和不良预后相关,外源性NTS刺激和高表达NTR1可以通过激活Wnt/β-catenin通路促进HCC细胞发生EMT来增强其侵袭性。