姜黄素分离与纳米颗粒制备及对疲劳应激损伤的修复作用

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:E200902027
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机体感到疲劳是一种正常的生理现象,但长期处于繁重的应急救灾工作和极大的身心压力环境下,疲劳无法快速得到缓解或者消除,就可能造成应激反应导致机体内分泌系统紊乱、线粒体功能障碍、免疫系统疾病的发生,从而对机体造成损伤。因此,寻找具有天然、安全、高效的抗疲劳应激活性物质一直是国内外的研究热点。本文从天然姜科植物姜黄中提取到的姜黄素为研究对象,对姜黄素提取物进行分离纯化工艺参数优化,采用反溶剂法为其设计构建新型蛋白-多糖纳米传递载体,并通过建立动物疲劳模型,研究姜黄素与其复合纳米颗粒对小鼠疲劳应激损伤的修复作用。采用柱层析法对姜黄素进行分离纯化工艺优化。首先,对13种固相介质进行筛选,得到ADS-7为姜黄素一级纯化大孔树脂。其次,进行单因素实验,确定最佳的上样浓度为1.5 mg/m L,上样量为20 m L,乙醇浓度为80%。随后,采用BoxBehnken设计对姜黄素进行响应面工艺参数优化,得到最佳上样量为19 m L;上样浓度为1.80 mg/m L;洗脱液浓度为80%,姜黄素一级纯化组分的纯度为27.93%。最后,以HPD-300大孔树脂为二级分离介质,最终得到姜黄素的纯度为56.25%。采用反溶剂法设计构建新型蛋白-多糖纳米传递载体,对其制备工艺参数优化、物理稳定性及体外抗氧化活性与释放率的进行研究。结果表明:筛选出玉米醇溶蛋白-阿拉伯树胶-亚麻籽胶作为负载姜黄素的传递载体,最佳的制备工艺参数为阿拉伯树胶与亚麻籽胶质量比8:2;初始多糖浓度0.04%,姜黄素与玉米醇溶蛋白质量比1:40;姜黄素复合纳米颗粒在p H值3~9、高温、长时间储存、离子强度小于100m M时具有良好的稳定性;包埋后的姜黄素具有较强的抗氧化能力,在模拟肠液中可以缓慢释放。通过建立小鼠疲劳模型,采用测定力竭运动时间与生化指标,综合评价姜黄素与姜黄素复合纳米颗粒对小鼠疲劳应激损伤的修复作用。结果表明,与模型组相比,姜黄素纳米颗粒可以显著延长小鼠力竭游泳时间、力竭跑步时间(P<0.001);CUR-ZGF纳米颗粒剂量组(中、高)的血清尿素氮、乳酸、血清肌酸激酶含量均显著降低,乳酸脱氢酶含量增加。本研究充分反映出姜黄素复合纳米颗粒具有修复疲劳应激损伤的作用,其抗疲劳应激活性优于游离的姜黄素以及姜黄素与壁材的混合物,开发新型抗疲劳应激食品提供理论依据。
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