脂肪性肝病(Fatty liver disease, FLD)包括由酒精所致的酒精性肝病（Alcoholic liver disease , ALD）和高脂、肥胖等因素所致的非酒精性脂肪性肝病（non- Alcoholic fatty liver disease，NAFLD）。目前国内日益增多的FLD多由酒精加高脂双重因素引起。高脂是否可加重酒精性肝损伤，机制如何？细胞凋亡在酒精或高脂诱发的FLD肝组织病变的形成中起何作用？酒精或高脂是通过什么途径激发肝组织炎症反应的？目前，这些问题尚无明确的结论。PPARγ为过氧化物酶体增殖物激活受体，是一类由配体激活的核转录因子，最新的研究结果显示其不仅与脂肪细胞的分化与成熟、胰岛素抵抗和血糖的调节有关, 还可能与肝脏炎症反应的发生与调控、肝细胞再生、肝癌细胞的凋亡有关。PPARγ在FLD发病机制中所起的作用和作用机制如何，还不甚清楚。为此，本研究试图摸索一种简单、方便、可行的应用酒精或高脂诱导脂肪性肝病大鼠模型的方法；以此大鼠模型研究细胞凋亡在FLD大鼠肝组织病理改变形成中的意义；酒精或高脂以及二者叠加所致的FLD大鼠肝组织NF-κB的活性变化、NF-κB的活性变化与肝组织炎症反应和凋亡的关系；过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白和mRNA的表达、及其与肝组织炎症反应、NF-κB结合活性的关系在FLD肝损伤机制中的作用，以从整体、组织、分子水平揭示脂肪性肝病的发病机制；观察复肝解毒方对酒精性肝损伤的治疗作用，在分子水平探讨该方治疗酒精性肝病的作用机制，为临床上应用复肝解毒方治疗本病提供理论依据。方法和结果 1 脂肪性肝病大鼠模型的建立及血清TNFα、肝组织MDA的变化为了摸索一种简单、可行的用酒精加高脂诱导脂肪性肝病大鼠模型的方法，并从氧化应激的角度、从整体水平探讨FLD大鼠血清TNFα、肝组织脂质过氧化与病理形态学变化的关系，为FLD机制的研究奠定基础。60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、酒精组、高脂组和酒精加高脂四组，除酒精组（30只）外每组10只大鼠。在标准饲料喂养的基础上，用<WP=5>逐渐增加酒精浓度（开始为40%，后增至50%、60%，15ml-1.kg-1.d-1）的方法酒精灌胃、高脂饮食或二者叠加的方法分别制作FLD的大鼠模型。16周断头处死（酒精组剩余20只做复肝解毒方治疗模型），采血、取肝组织标本, 分离血清和制作肝匀浆，保存于-200C冰箱。用日本Olympus AU2700 全自动生化分析仪测定血清TC、TG、ALT水平 ；分别用放免法（北京福瑞生物工程公司）、比色法、TBA法（南京建成生物工程研究所）测定血清TNFα、FFA水平和肝组织MDA含量；用10%福尔马林、4%戊二醛锇酸固定肝组织标本，分别以HE、SudanⅣ、Masson三重染色观察肝组织光镜下的病理改变，同时在HITACHI H7500透射电镜下观察其超微结构的变化, 结果如下。普通病理和超微结构的观察结果显示：在造模16周各模型组大鼠肝组织表现有明显的脂肪变性、坏死、炎性细胞浸润和轻度纤维化，单纯高脂组和酒精加高脂组脂肪变性最为明显，酒精加高脂组的炎性反应和纤维化最重，在正常组、酒精组、高脂组、酒精加高脂组的脂肪变性量化评分分别为1.34±0.33、12.79±2.73、 35.82±8.52、 37.97±11.48; 炎症评分为 0.67±0.66、4.35±0.56、 3.05±0.72、5.71±1.03; 纤维化评分为2.03±0.87、11.85±3.89、7.90±2.79、19.02±4.01。各模型组大鼠血清TC、TG、ALT、TNFα、FFA和肝组织MDA均显著高于正常对照组，以单纯高脂组和酒精加高脂组血脂和FFA升高最为显著，血清TNFα水平、肝组织MDA含量则以酒精加高脂组为最高。上述结果说明，本方法可以分别成功制作酒精、高脂或二者叠加所诱导的ALD、NAFLD大鼠模型，高脂可加重酒精性肝损伤，肝组织脂质过氧化、以TNFα为代表的细胞因子参与了FLD肝组织病理改变的形成。 实验性脂肪性肝病大鼠肝细胞凋亡与组织病理的对比研究在脂肪性肝病肝组织病变的形成过程中，存在肝细胞的变性和坏死，肝细胞的凋亡是否也参与了肝组织病变的发生和发展？高脂饮食可通过增加肝内脂肪沉积，加重其脂质过氧化反应，加剧酒精性肝损害，高脂对肝细胞的凋亡的发生有何影响呢？为此用TUNEL法（试剂盒购于北京中山生物技术有限公司）观察各组大鼠肝细胞凋亡的发生及其程度，并与肝组织炎症活动度、血清TNFα水平和肝组织MDA含量进行相关分析, 结果如下。 <WP=6>2. 1各模型组大鼠肝细胞凋亡指数明显增高，酒精组、高脂组、酒精加高脂组分别为3.73±1.82、2.91±1.04、5.52±2.03 ，显著高于正常对照组（1.45±0.83，P<0.05）；酒精加高脂组的肝细胞凋亡指数显著高于单纯酒精组和单纯高脂组（P<0.05）。模型组凋亡细胞多见于中央静脉周围的小叶3区，在炎症、坏死明显的区域阳性染色细胞较多见。2.2 模型组肝细胞凋亡指数与肝组织炎症评分、血清TNFα水平和肝组织MDA 含量正相关。 说明在FLD肝组织病理改变的形成中既有肝细胞坏死，又有肝细胞凋亡。肝组织炎症坏死反应和氧化应激越重，细胞凋亡发生率越高。高脂通过增加酒精性肝损伤大鼠体内的氧化应激，促进肝细胞凋亡的发生 。3 脂肪性肝病大鼠肝组织NF-κB活性的变化NF-κB作为一种重要的炎症前基因的急早期转录调控?