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目的:
研究DLK1、Jagged1在不同种类肝脏疾病中表达的规律,分析其与原发性肝细胞性肝癌(primary human hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展的关系,进一步探讨DLK1、Jagged1二者表达的内在联系,是否有相互作用的机制存在以及这种作用机制对肝癌临床病理的影响,进而寻找在肝癌组织中特异表达的分子生物学指标,为肝癌的诊断及治疗提供更可靠的依据。
方法:
采用免疫组化S-P法检测150例肝细胞性肝癌,50例肝硬化,50例肝炎,10例正常肝组织中DLK1蛋白、Jagged1蛋白的表达;采用原位杂交法检测150例肝细胞性肝癌,50例肝硬化,50例肝炎,10例正常肝组织中DLK1 mRNA和Jagged1 mRNA的表达。
结果:
(1)DLK1蛋白阳性表达以胞质型为主,阳性细胞分布呈小巢状或散在分布,部分在胞外基质有表达。150份HCC组织DLK1蛋白阳性97份,阳性率为64.66%,50份肝硬化组织中阳性14份,阳性率为28.00%,50份肝炎组织中阳性3份,阳性率为6.00%,10份正常对照阴性。四者之间的差异有统计学意义(x2=68.40,P<0.05)。HCC组阳性表达明显高于其他三组(x2=20.41,x2=51.63,x2=16.42,P均<0.05)。DLK1 mRNA阳性反应物呈红色,位于胞质中,弥漫全浆分布。150份HCC组织中DLK1 mRNA阳性83份,阳性率为55.33%,50份肝硬化组织中阳性10份,阳性率为20.00%,50份肝炎组织中阳性5份,阳性率为10.00%,10份正常对照DLK1 mRNA呈阴性表达。四种不同组织之间的DLK1mRNA差异有统计学意义(x2=48.92,P<0.05),且DLK1 mRNA在HCC组织中的表达高于在肝硬化、肝炎和正常肝组织中的表达(x2=18.82,x2=31.28,x2=11.50,P均<0.05)。
(2)Jagged1蛋白阳性信号主要定位于细胞质,呈棕黄色颗粒状,背景不着色,巢状或弥漫分布,部分在胞外基质有表达。Jagged1在正常肝组织、肝炎、肝硬化组织和肝癌组织中的阳性率分别为40.00%(4/10)、40.00%(20/50)、62.00%(31/50)、71.33%(107/150),四者之间的差异有统计学意义(x2=17.92,P<0.05),Jagged1在肝癌组织较高表达,且Jagged1在HCC中的表达高于在肝炎、正常肝组织中的表达(x2=15.89,x2=4.33,P均<0.05)。Jagged1 mRNA阳性信号以胞质型为主,红色颗粒状,弥漫全浆分布。正常肝组织、肝炎、肝硬化组织和肝癌组织Jagged1 mRNA的阳性率分别为20.00%(2/10)、36.00%(18/50)、36.00%(18/50)、60.67%(91/150),四者间差异有统计学意义(x2=18.25,P<0.05),且Jagged1 mRNA在HCC中的表达高于在肝硬化、肝炎、正常肝组织表达(x2=9.20,x2=9.20,x2=6.37,P均<0.05)。
(3)在150例肝癌组织中,DLK1蛋白和Jagged1蛋白表达强度之间存在正相关(r=0.70,P<0.05)。DLK1 mRNA和Jagged1 mRNA表达强度之间存在正相关(r=0.56,P<0.05)。
结论:
(1)DLK1在正常肝组织中缺失表达,在肝癌组织中高表达,且在HCC中的表达明显高于在肝硬化、肝炎和正常肝组织中的表达;Jagged1蛋白在肝癌组织中较高表达,在HCC中的表达高于在肝炎、正常肝组织中的表达。
(2)DLK1和Jagged1在肝癌组织中的表达强度之间存在正相关,提示二者在肝癌的发生和发展过程中具有一定的协同互助作用。
(3)DLK1在HCC中的表达与年龄、性别、HBsAg及转移比较,差异均无统计学意义,与肿瘤大小、组织学分级有关;Jagged1表达与性别、肿瘤大小及转移无关,与年龄、HBsAg及组织学分级有关。提示二者在肝癌的发展过程中均具有一定作用,在一定程度上可以作为评价肿瘤预后的生物学指标。