旋毛虫是一种重要的人兽共患寄生虫病,能严重危害人类的健康,给公共卫生安全带来极大威胁。因此,开发适用于现场的高效、灵敏的旋毛虫检测方法,能有效地缩短旋毛虫的检验时间,并为旋毛虫的防治提供方法和技术支持。在本研究RPMI1640培养液培养旋毛虫肌幼虫而获得肌幼虫排泄分泌(ES)抗原,并通过其检测不同感染条件下的猪阳性血清,所得结果作为试纸条检测准确性的参照。同时应用肌幼虫ES抗原作为诊断抗原,通过对各种固相材料的选择和反应体系及反应条件的优化,建立了一种基于荧光微球标记山羊抗猪IgG的旋毛虫免疫层析试纸条,并应用于猪旋毛虫感染的血清学检测。经过体外培养得到浓度为2mg/ml的肌幼虫ES抗原。ES抗原经Western blot鉴定可以与旋毛虫感染阳性猪血清发生特异性结合。利用喷涂有1mg/ml ES抗原和0.625mg/ml兔抗山羊IgG的NC膜、喷涂有时间分辨荧光微球标记的山羊抗猪IgG的结合垫Ahistrom8964,并连同XQ-Y8样品垫、荧光专用黑色底板和吸水纸H5072进行旋毛虫荧光免疫层析试纸条的组装。该试纸条可检测到1:100稀释的猪血清中的抗旋毛虫抗体,与抗猪囊虫、华支睾吸虫等血清无交叉反应;应用该试纸条与OIE认定的旋毛虫血清学标准检测方法酶联免疫吸附方法(ELISA)进行检测比较,结果表明试纸条的检测效果较标准血清学检测方法在感染剂量为1000条时晚10天,但不同感染量不同感染天数的阳性血清IgG抗体水平趋势大致相同。结果表明,本研究建立的旋毛虫荧光免疫层析试纸条具有良好的特异性、灵敏性和重复性等,能够快速检测出猪血清中的旋毛虫抗体,并可应用于现场初筛。