清消法改善痤疮模型大鼠局部炎症反应及其机制研究

来源 :河北中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiantangdaoguo
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目的:观察清消法对痤疮模型大鼠耳廓炎症反应的影响,并进一步探讨其治疗痤疮的作用机制。方法:将40只大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和中药组,每组10只,采用耳廓注射p.acnes的方法复制痤疮模型。中药组给予枇杷清肺饮加减方,西药组给予异维A酸胶囊,其他两组给予等剂量生理盐水,灌胃,每天1次,21天后,观察大鼠耳外观及病理变化、测量大鼠耳廓厚度,计算大鼠耳廓组织肿胀率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠血清中TNF-α、IFN-γ含量,免疫组化(IHC)和蛋白质印迹(Western blot)检测大鼠病灶组织中的TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β蛋白表达。结果:1.大鼠耳廓外观形态变化空白组大鼠耳廓柔软,颜色为淡粉色,毛细血管清晰可见,无丘疹、脓疱、角栓等皮损;模型组大鼠耳廓颜色暗红,毛囊口增厚、粗糙、干燥,兼有散在丘疹、脓疱,注射处真皮层毛细血管扩张明显;中药组和西药组与模型组比较,大鼠耳廓红肿减轻,丘疹、脓疱不同程度的减少,毛细血管较清晰。2.大鼠耳廓厚度及肿胀率变化造模前,各组大鼠耳廓厚度差异无统计学意义(P>0.05)。造模后,与空白组比较,模型组大鼠耳廓厚度及肿胀率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,西药组、中药组的大鼠耳廓厚度及肿胀率有所改善(P<0.05);与西药组比较,中药组大鼠耳廓厚度及肿胀率差异无统计学意义(P>0.05)。3.大鼠耳廓组织病理变化空白组大鼠耳廓组织无明显异常,无炎性细胞,表皮各层界限清晰、完整;模型组大鼠耳廓可见毛囊上皮与表皮颗粒层均增厚,表皮过度角化,表皮、真皮、皮下组织界限模糊,相邻毛囊扩张融合,毛囊口被角化物质填堵延伸至皮脂腺,漏斗部呈壶状扩大,真皮层可见扩张的毛细血管,毛囊周围炎性细胞浸润;西药组表皮增厚缓解,毛囊口角化减轻,仅有少量炎性细胞浸润;中药组毛囊扩张程度明显减轻,炎性细胞浸润减少,且角化层逐步恢复完整。4.大鼠血清TNF-α、IFN-γ含量与空白组比较,模型组大鼠血清TNF-α含量较高,IFN-γ含量较低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组、西药组大鼠血清TNF-α含量较低,IFN-γ含量较高,差异具有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,中药组大鼠血清TNF-α及IFN-γ含量差异无统计学意义(P>0.05)。5.免疫组化法检测大鼠耳廓组织TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β蛋白表达与空白组比较,模型组大鼠耳廓组织TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组、西药组大鼠耳廓组织TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β表达均显著下调(P<0.05);与西药组比较,中药组与其差异无统计学意义(P>0.05)。6.Western blot检测大鼠耳廓组织中TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β的蛋白表达与空白组比较,模型组大鼠耳廓组织TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组、西药组大鼠耳廓组织TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,中药组大鼠耳廓组织TLR-2蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05),My D88、NF-κB、IL-1β蛋白表达不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.清消法可以改善痤疮模型大鼠耳廓局部炎症反应。2.清消法通过调节TLR-2/My D88/NF-κB信号通路,下调TLR-2、My D88、NF-κB、IL-1β蛋白的表达,降低血清TNF-α含量,升高IFN-γ的含量,抑制痤疮模型大鼠耳廓局部炎症反应,达到有效治疗痤疮的目的。
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