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本试验以“赛娃”、“红花草莓”、“公四莓一号”、“阿迪”等几个草莓品种为试材,研究了基本培养基、草莓基因型、激素配比、pH值、接种方式、继代时间、暗培养时间对草莓不定芽再生的影响,优化了草莓再生条件,建立了赛娃的叶片高效再生体系,获得了抗草丁膦的抗性植株,建立了草莓品种“赛娃”的遗传转化体系。 主要取得以下研究结果: 1 基因型和再生培养基的初步筛选 以田间采集的草莓叶片为试材,对基因型和再生培养基进行了初步筛选,同时获得了上述4个品种的无菌试管苗,再生实验结果表明,赛娃草莓的叶片再生能力明显高于其它3个品种,为此,试验选定赛娃做进一步的再生和转化的研究。 2 不同因素对草莓试管苗叶片再生的影响 (1)基本培养基和激素配比对再生的影响 基本培养基和激素配比直接影响草莓再生,MS培养基与MS(无机成分)+B5(有机成分)和1/2MS培养基相比,可得到较高的不定芽再生率。细胞分裂素KT与6-BA单独使用效果不明显,二者混合使用叶片的再生率与每个叶片的再生芽数均明显提高,而且再生不定芽长势良好。外植体可在MS+KT1.0mg/L+BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基上再生,再生率达到91.7%,再生芽可在MS+KT1.0mg/L+BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L的培养基上增殖,再生苗适宜的生根培养基为1/2MS。 (2)蔗糖、琼脂浓度和pH值对草莓叶片再生的影响 蔗糖、琼脂浓度和pH值也对草莓再生有显著影响,蔗糖在组织中既是碳素来源和能量物质,又是重要的渗透压调节剂。琼脂是植物组织培养中良好的固定剂,对外植体起到一定的支撑作用。每种植物只有在适宜的pH值下才能得以正常生长。本研究认为在培养基中加入20g/L蔗糖,7g/L琼脂,pH值调到5.8时对草莓叶片的再生具有促进作用。 (3)其他因素对草莓叶片再生的影响 在暗处理培养时,与以往研究结果不同的是:暗培养对草莓品种赛娃的再生