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研究背景帕金森病(Parkinson disease, PD)是常见的中枢神经系统退行性疾病[¨,临床表现有典型的运动症状和非运动症状。Braak提出假说,认为路易小体最先出现在嗅球和胃肠道中,随着疾病进展,这些病理标志物会出现在嗅球和迷走神经,继而出现在脑干。当帕金森病患者表现出明显的临床症状时,黑质致密部超过70%的多巴胺能神经元已经死亡,并伴有明显的路易小体形成和炎症反应。最终,这些病理改变也会累及前脑和皮质。这个假说可以很好的解释运动和非运动症状的出现、疾病的进展及多个系统受累的情况[2]。帕金森病的发病机制复杂,可能与遗传环境因素、免疫炎症、线粒体功能障碍、凋亡等相关。近来研究发现,帕金森病的发生发展与炎症有着密切的联系,包括中枢和外周的炎症相关基因表达增多,脑内小胶质细胞的激活,外周淋巴细胞的构成比例改变及侵入中枢神经系统等。目前关于帕金森病中枢神经系统的免疫机制的研究较多,本研究拟对帕金森病患者的外周免疫系统进行研究。本研究包括两个主要内容：1.帕金森病患者外周血单核细胞CD14和TLR4中mRNA的表达水平；2.帕金森病患者血浆TNF-α和IL-6与非运动症状的相关性分析。第一章帕金森病患者外周血单核细胞CD14和TLR4中mRNA的表达水平研究目的检测帕金森病患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中脂多糖受体(cluster of differentiation 14, CD14)和toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)中mRNA的表达,并探讨其在帕金森病发生发展中的临床意义。研究方法本实验共纳入44例原发性帕金森病患者(PD组)及37例性别、年龄相匹配的健康对照者(正常对照组),利用RT-PCR技术检测两组研究对象外周血单核细胞中CD14mRNA、TLR4 mRNA表达。所有入组的帕金森病患者均详细记录发病年龄、病程,在关期时对帕金森病患者进行H-Y分期、UPDRSⅡ、UPDRS Ⅲ、NMSS评分,研究结果与正常对照组((1.162±0.631) 2-ΔΔCT、(1.122±0.557)相比,帕金森病组外周血单核细胞CD14 mRNA(1.459±0.658) 2-ΔΔCT和TLR4 mRNA (1.408±0.698)表达均显著增加(P均<0.05),PD组CD14 mRNA的表达水平与H-Y分期呈显著正相关(P<0.05)。结论帕金森病患者外周血单核细胞CD14 mRNA的表达与反应其疾病严重程度的H-Y分期呈正相关,提示表达CD14/TLR4单核细胞所介导的固有免疫反应可能参与帕金森病发生、发展。第二章帕金森病患者血浆TNF-α和IL-6与非运动症状的相关性分析研究目的检测帕金森病患者血浆肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)和白介素-6 (interleukin-6, IL-6)的表达水平,并探讨其与帕金森病患者非运动症状的相关性。研究方法本实验共入组41例帕金森病患者(PD组)和37例性别、年龄相匹配的健康对照者(正常对照组),并采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune sorbent assay, ELISA)检测各研究对象外周血浆TNF-α和IL-6的水平。所有入组的帕金森病患者均详细询问病史,记录发病年龄、病程,并在关期时采用H-Y分期、UPDRS Ⅱ、UPDRS Ⅲ、NMSS评分评价帕金森病患者的运动和非运动症状。研究结果PD组血浆TNF-α和IL-6水平较正常对照组显著降低(均P<0.05)。 相关性分析显示PD组TNF-α水平与H-Y分期、UPDRS Ⅱ、UPDRS Ⅲ、NMSS评分均不相关(r=0.093, P=0.562; r=-0.024, P=0.882;r=0.131, P=0.415; r=-0.109, P=0.499). PD组IL-6水平与其H-Y分期、UPDRS Ⅱ、NMSS评分均呈负相关(r=-0.411, P=0.008; r=0.321, P=0.041; r=-0.324, P=0.039),与UPDRS Ⅲ不相关(r=-0.126,P=0.431)。结论帕金森病患者可能存在免疫炎症机制的异常,且免疫异常可能参与帕金森病非运动症状的发生发展过程。