【摘 要】
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草鱼是我国重要淡水养殖鱼类,在养殖过程中时常面临许多非生物和生物因素胁迫,草鱼通常以增强特定代谢过程来抵抗外界的胁迫。非生物胁迫的因素很多,微塑料刺激是重要原因,本研究以转录组为切入点,研究了两种浓度微塑料胁迫下,对草鱼生理、生化指标的影响,差异表达基因及富集到的信号通路,揭示了微塑料刺激下脂质代谢紊乱的主要原因。抗生物胁迫以抗病原菌为主,选择嗜水气单胞菌为刺激源。以miRNA为切入点,探究了非编
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草鱼是我国重要淡水养殖鱼类,在养殖过程中时常面临许多非生物和生物因素胁迫,草鱼通常以增强特定代谢过程来抵抗外界的胁迫。非生物胁迫的因素很多,微塑料刺激是重要原因,本研究以转录组为切入点,研究了两种浓度微塑料胁迫下,对草鱼生理、生化指标的影响,差异表达基因及富集到的信号通路,揭示了微塑料刺激下脂质代谢紊乱的主要原因。抗生物胁迫以抗病原菌为主,选择嗜水气单胞菌为刺激源。以miRNA为切入点,探究了非编码RNA在细菌感染下对糖酵解过程的调节机制,揭示了细胞通过增强糖酵解过程以抵抗细菌感染的分子机制。获得的主要研究结果如下:1.草鱼暴露于两种浓度的MPs（1000和100μg/L）21天后,在肝脏消化液中检测到荧光信号,肝组织出现细胞质空泡化,发现体重增长受到抑制。体内抗氧化系统受到抑制,氧化应激反应得到增强。在肝脏中共鉴定获得1,554个差异表达基因。KEGG通路显著富集于能量代谢相关通路和过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）信号通路。2.在草鱼中克隆和表征了4个代谢相关基因apoe、ppar-α、cyp1a1和ugt1a1,探讨它们在微塑料胁迫下的转录表达变化。结果发现,4个基因在所检测组织中广泛表达,微塑料胁迫可诱导它们的表达。表明微塑料扰乱草鱼正常代谢过程,导致脂质代谢紊乱,显著激活外源代谢途径。细胞色素P450家族1亚家族A成员1（CYP1A1）和UDP葡萄糖醛酸基转移酶家族1成员A1（UGT1A1）长时间高水平表达以维持体内代谢稳态。3.本实验室前期在草鱼抗病和易感群体中筛选得到了差异表达的miR-146b。通过软件预测得到了可以结合miR-146b的lncRNA:Tmem110-IT和下游靶基因:pfkfb3。双荧光素酶报告系统进一步证实它们之间的调节关系,Tmem110-IT可以通过吸附miR-146b介导pfkfb3表达,从而发挥生物学功能。通过测定草鱼细胞的糖酵解通量和存活率,发现Tmem110-IT通过提高糖酵解通量协助抵抗细菌感染,提高细胞的存活率。
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