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1目的本课题通过测定氟伐他汀钠的血浆蛋白结合率,大鼠在体肠吸收,以及新西兰兔体内的生物利用度来研究其原料药的药动学特性；以实验室自制的氟伐他汀钠缓释片(80mg)作受试制剂、已上市的氟伐他汀钠缓释片作参比制剂(80mg,北京诺华制药有限公司生产),进行体外释放度和比格犬体内药动学研究,来考察两种缓释制剂的药动学特性,并评价其相对生物利用度和生物等效性,以及体内外相关性,从而进一步为受试制剂的处方优化和质量评价提供参考。2方法与结果2.1氟伐他汀钠血浆蛋白结合率的测定采用超滤法和HPLC法测定氟伐他汀钠在牛血清白蛋白(BSA),大鼠血浆和新西兰兔血浆中的蛋白结合率。色谱条件为：流动相：甲醇-水(含0.4%甲酸)=80：20,流速为1mL·min-12检测波长为235nm,室温,以定量环定量进样25μL。氟伐他汀钠与BSA,大鼠血浆和新西兰兔血浆在5.0,50.0,100.0mg.L-1的含药血浆中其平均蛋白结合率分别为(99.38±0.83)%,(99.51±0.83)%,(99.27±0.84)%。2.2氟伐他汀钠肠吸收特性研究运用大鼠在体单向肠灌流模型,采用HPLC法对药物质量浓度进行检测,以百分吸收率(P%)、吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Pαpp)为指标,从药物浓度、吸收部位和酚红3个方面对氟伐他汀钠的肠吸收特性进行考察。药物浓度对Ka和Papp有显著性影响(P<0.05),而药物在小肠各段的Ka和Papp无显著性差异(P>0.05)；P%与药物浓度和吸收部位均有关(P<0.05)；在中浓度肠灌流液中加入适量酚红后,药物在小肠各段的P%、Ka和Papp均显著减小(P<0.05)。2.3氟伐他汀钠生物利用度研究两组新西兰兔分别静脉注射(80mg)和灌胃(120mg)给予氟伐他汀钠后,于不同时间点颈总动脉插管取血,血浆经处理后用HPLC法进行检测,计算其在新西兰兔体内的生物利用度。氟伐他汀钠在2.5～300.0mg·L-1(γ=0.9999)和1.0～15.0mg·L-1(r=0.9976)范围内线性关系均良好,日内和日间精密度RSD均小于3.0%,静脉注射和灌胃给药血浆样品的提取回收率分别大于98%和59%；静脉注射氟伐他汀钠后其体内过程为二室模型,AUC0→∞为(385.59±17.53)mg·L-1·h,t1/2(α)为(0.29±0.13)h,t1/2(β)为(2.61±0.27)h；灌胃氟伐他汀钠后其体内过程为单室模型,AUC0→为(53.54±4.78)mg·L-1·h,f1/2为(2.94±0.37)h,Cmax为(8.55±0.35)mg·L-1,Tmax为(1.41±0.25)h,其绝对生物利用度为9.26%。2.4氟伐他汀钠受试制剂与参比制剂的体外释放度研究以实验室自制的氟伐他汀钠缓释片(80mg)为受试制剂,已上市的氟伐他汀钠缓释片(80mg,北京诺华制药有限公司生产)为参比制剂,并参照氟伐他汀钠胶囊的国家药品标准,以纯化水为释放介质,测定了氟伐他汀钠两种缓释制剂的体外释放度,并以其释放度数据拟合体外释药模型,绘制其体外平均累积释放百分率-时间曲线,进而对两种缓释制剂的体外释放度和释药曲线进行评价。结果表明,两种缓释制剂的体外释放度均符合国家药典标准,其体外释药过程更为符合Weibull模型,其中受试制剂的体外释药拟合方程为lnln[1/(1-yt]=1.264lnt-2.203,r=0.9742,AIC=-28.6862,参比制剂的体外释药拟合方程为lnln[1/(1-yt)]=1.187lnt-2.098,r=0.9793, AIC=-34.0390:应用模型非依赖性方法中的差异因子(f1)和相似因子(f2)来比较受试制剂和参比制剂的体外释药曲线,计算得到f1值为4.25,f2值为99.98。2.5氟伐他汀钠受试制剂与参比制剂的体内药动学研究以实验室自制的氟伐他汀钠缓释片(80mg)为受试制剂,已上市的氟伐他汀钠缓释片(80mg,北京诺华制药有限公司生产)为参比制剂,采用单剂量双周期交叉给药方案,研究氟伐他汀钠受试制剂与参比制剂在比格犬体内的药动学行为,绘制两种缓释制剂的血药浓度-时间曲线,计算其药动学相关参数,初步评价其相对生物利用度及生物等效性,并对两种缓释制剂的体内外相关性进行研究,从而进一步为受试制剂的处方优化和质量评价提供参考。结果表明,氟伐他汀钠两种缓释制剂在比格犬体内的转运均为一级动力学过程,选用二室模型计算主要药动学参数,其中受试制剂的Cmax为(734.45±16.54) ng·mL-1,Tmax为(1.25±0.18)h,AUC0→∞为(9654.05±243.62)ng·mL-1·h,其体内外相关性回归方程为Fa=0.6361F+7.1027r=0.9165；参比制剂的Cmax为(856.12±19.37)ng·mL-1,Tmax为(2.17±0.23)h,AUCO→∞为(10260.62±278.31)ng·mL-1·h,其体内外相关性回归方程为Fa=0.7489F+4.8298r=0.9391。氟伐他汀钠受试制剂的相对生物利用度为94.1%,其在参比制剂AUC的90%可信限范围内(80%-125%)。3结论氟伐他汀钠与BSA,大鼠血浆,新西兰兔血浆蛋白都有很强的结合,且在已考察的血药浓度范围内其血浆蛋白结合率无明显浓度依赖性和种属差异性。氟伐他汀钠在大鼠小肠(十二指肠、空肠、回肠)吸收良好,且无特定吸收部位；但有高浓度饱和现象,表明药物的转运可能有载体的参与；酚红的加入显著影响了药物在大鼠小肠的吸收,表明在肠吸收水分校正中,重量法比酚红法更为准确可行。氟伐他汀钠在新西兰兔体内的生物利用度较低,可能与其在肝脏代谢较快有关。氟伐他汀钠受试制剂与参比制剂的体外释放度均符合国家药典标准,其体外释药过程均更为符合Weibull模型,且受试制剂与参比制剂的体外释药曲线具有相似性。氟伐他汀钠受试制剂与参比制剂在比格犬体内具有生物等效性,且两种缓释制剂的体内外相关性均良好,呈一级相关。