肿瘤细胞靶向转录载体的研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muzhou22
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基因治疗的一个主要问题是对治疗基因表达的空间和时间的控制。一些肿瘤治疗方案中,转移基因在肿瘤外组织和细胞中的表达导致正常组织的破坏和难以预料的毒性。因此,如果能以精确地调控或特异性地靶向表达的方式控制治疗基因的表达,则可极大地提高基因治疗的安全性和有效性。人端粒酶活性与肿瘤细胞之间有良好的相关性,85%以上的恶性肿瘤端粒酶活性被重新激活,而绝大多数成年体细胞的端粒酶活性为阴性。实验证明,端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)的激活表达是端粒酶活性重新激活的限速步骤。根据hTERT在肿瘤细胞中的重新激活而在正常体细胞中沉默的特点,提示可应用催化亚基的调控表达序列,构建肿瘤细胞靶向转录载体,为肿瘤的生物治疗提供一种新的特异性表达系统。本研究应用hTERT的启动子序列构建肿瘤细胞靶向转录逆转录病毒载体。以端粒酶催化亚基起始转录区的上游-1到-2069段的启动子序列分别构建调控报道基因EGFP、P53和TK的逆转录病毒载体pRH2kbEGFP、pRH2kbP53、pRH2kbTK。以脂质体
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