真菌利用纤维素和木质素形成腐殖物质及其结构特征研究

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针对真菌利用纤维素和木质素在不同培养条件下对腐殖物质(HS)组分动态变化及结构特征的影响问题,本研究采用土壤模拟和液体纯培养方法,研究了木霉、黑曲霉和青霉利用两类基质对黑土HS组分数量及形成顺序的影响和纯培养条件下不同培养时期所形成菌体残留物的性质及其所提取类HS组分数量变化的规律,所得结论如下:(1)土培条件下,不同种群微生物培养对混有麦秸黑土的腐殖质组分均产生数量和性质的双重影响。培养过程中,微生物对黑土总有机碳(TOC)不断消耗,尤以对水溶性物质(WSS)的利用为主,其在细胞内先合成胡敏酸(HA),而后通过胞外微生物将其降解为富里酸(FA)。真菌在合成HA和降解FA方面的作用最为显著。微生物有利于惰性组分的瓦解,促使麦秸类腐殖质向成熟腐殖质转化。(2)以纤维素和木质素为基质碳源进行土培,真菌和混合菌对黑土TOC及WSS组分均有消耗。纤维素含有较多性质相似于FA组分的有机分子,而该组分在木质素中含量甚微。青霉利用纤维素有利于黑土FA组分数量的提高,而其利用木质素所表现的规律相反。黑曲霉利用两基质均有利于黑土FA组分的消耗。木霉和混合菌利用纤维素有利于黑土FA碳含量的提高,而以木质素为基质时该组分数量有所降低。利用纤维素,各处理对FA与HA间形成顺序的影响符合木质素理论;而利用木质素,木霉和黑曲霉对黑土两组分间的转化规律符合多酚理论。青霉对木质素的降解、氧化并行,促使黑土两组分间不断转化。而混合菌对木质素的作用规律亦符合木质素理论。添加纤维素可增大原土胡敏素(Hu)的碳含量,而木质素中极少存在相似于铁结合胡敏素(HMi)和不溶性胡敏素(HMr)的有机分子。各处理利用纤维素对黑土HMi组分数量提升效果明显,而基质改为木质素后,该组分数量有所降低。无论是何种基质,木霉均可有效提升黑土可提取腐殖酸的比例,黑土HMr组分数量受微生物影响均呈降低趋势。(3)液培条件下,以玉米秸秆为基质,比照CK结果,代谢产物和残留物碳含量均有损失;而以锯木屑为基质时,规律则表现为提高代谢产物和降低残留物碳含量两方面,青霉作用最为显著;玉米秸秆残留物脂族化程度可被黑曲霉、青霉和混合菌有效提高,青霉优势显著,而前两者亦有利于木屑残留物的降解。同条件下,利用玉米秸秆所形成的残留物,其WSS组分在培养结束后均有净损失,而锯木屑为基质时规律相反;各处理利用两基质对其残留物FLA与HLA间形成顺序的影响均符合多酚理论,即先形成类富里酸(FLA)而后向类胡敏酸(HLA)转化。前者木霉作用较强,而后者混合菌作用显著。玉米秸秆残留物类Hu可被有效转化,木霉作用明显,而同条件下锯木屑则有利于该惰性组分的积累。(4)分别以两基质为碳源,真菌和混合菌液培条件下均有促使代谢产物碳含量降低、残留物产率增加的作用。在转化纤维素和木质素效率方面,混合菌和木霉各具优势。与纯样品相比,各处理所得菌体残留物含氮化合物均有所增加,纤维素为基质时有利于残留物分子芳构化程度提高、含氧官能团数量降低,而木质素规律相反,表现为氧化降解过程。培养中,木霉和黑曲霉利用纤维素均有利于残留物HLA分子间的聚合,而同条件下青霉和混合菌可使该组分发生氧化、脱氢及分解作用。酚类物质在纤维素残留物混合样品FLA组分中的出现,表明其为FA组分形成进程中不可或缺的中间产物;在残留物类Hu组分方面,青霉亦利于其氧化脱氢降解,木霉作用相反。而在利用其含氮化合物方面,混合菌优势大于单一真菌,黑曲霉作用最弱,致使其在类Hu组分中积聚一定数量的氨基化合物;青霉利用木质素所形成残留物的脂族化程度最高、氧化程度最强,尽管其残留物中稳定性物质略有提高,但仍与腐殖质间存在差距,而其余三者均有利于木质素直接氧化降解为类腐殖质,其中木霉残留物与类腐殖质结构最为相似;以黑曲霉为例,纤维素为基质所形成的残留物,其有机质成熟度较差,而以木质素为基质,残留物有机碳结构的疏水程度和稳定性较高且抗分解有机碳的比例较多。青霉利用纤维素可促使残留物FLA组分数量降低,而其利用木质素则有利于该组分的累积,其余三者利用两基质均有利于残留物FLA组分数量的提升;残留物HLA方面,木霉和青霉利用纤维素可促使其数量增加,而同条件下,基质改为木质素后,两者对该组分有消耗作用。无论是何种基质,黑曲霉和混合菌均有消耗残留物HLA组分的作用。尽管木霉、黑曲霉和青霉因其本身特性相异,但其均可利用两类基质在土培或液培条件下对黑土腐殖质或菌体残留物所提取的类腐殖质形成起推动作用,解决了不同真菌在不同培养环境下利用两类基质对腐殖质形成特征的影响问题,对腐殖质形成途径、组分特征及其形成过程中真菌的主导作用等问题的阐明均具有重要意义。
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