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目的:(1)通过悬液注射法建立兔VX-2胃癌腹腔转移模型,并分组予以DDP、Endostar、PA-MSHA行腹腔恒温循环热灌注化疗,证实DDP、Endostar、PA-MSHA药物联合腹腔恒温循环热灌注的安全性并分析其疗效。(2)通过免疫组织化学方法测定兔VX-2胃癌腹腔转移模型各组死亡标本中PCNA、VEGF的表达,探讨DDP、Endostar、PA-MSHA联合腹腔恒温循环热灌注抑癌的可能机制。方法:选择36只新西兰大白兔采用肿瘤悬液注射法建立兔VX-2腹膜转移瘤模型,灌注前1天测定实验动物的血常规、肝肾功能、电解质,持续观测体重、食欲等情况变化。造模后第9天,开腹探查行ePCI评分并取癌灶行HE染色,将36只实验动物随机分成6组,分别为A组:造模后予以Endostar+DDP腹腔恒温热灌注;B组:造模后予以Endostar腹腔恒温热灌注;C组:造模后予以DDP腹腔恒温热灌注;D组:造模后予以PA-MSHA腹腔恒温热灌注;E组:造模后予以Endostar+DDP+PA-MSHA腹腔恒温热灌注;F组:阴性对照组:悬液注射法造模。实验组第一次腹腔恒温热灌注后第3天重复灌注1次。阴性对照组不予腹腔恒温热灌注。测定各组实验动物第一次灌注后第4天的血常规、肝肾功能、电解质,观测其体重、食欲等情况变化。记录实验动物的生存期、不良事件及腹泻并发症发生情况。大体观察实验动物死亡标本再次行e-PCI评分,并行腹腔内粘连评分,取标本送病检HE染色以及免疫组织化学检测VEGF、PCNA表达情况。有腹水的取腹水行病理学脱落细胞图片检查。最后对上述指标进行统计学分析。结果:(1)各组实验动物在第1次腹腔恒温循环热灌注化疗前1天、后第4天外周动脉血血常规、肝肾功能、电解质均无统计学上差异(P>0.05)。(2)各组实验动物不良事件及并发症发生率较低。DDP、Endostar、PA-MSHA联合腹腔恒温循环热灌注化疗组E组1只实验动物在造模后31天慢性腹泻死亡,DDP联合Endostar腹腔恒温循环热灌注化疗组A组、DDP腹腔恒温循环热灌注化疗组C组、三药联合应用腹腔恒温循环热灌注化疗组E组均分别有3、2、3只实验动物有过腹泻症状,经抗生素治疗后均在1周内痊愈。(3)各组实验动物生存期情况:A组生存期36.33±3.72天,B组生存期31.17±3.66天,C组生存期32.00±3.58天,D组生存期30.80±4.71天,E组生存期37.50±7.34天,F组生存期25.17±2.93天。治疗组(A、B、C、D、E组)与阴性对照组F组之间差异均有统计学意义,P值均<0.05。联合用药A组(Endostar+DDP灌注组)与B组(Endostar灌注组)、C组(DDP灌注组)均有统计学差异,P值分别为0.33,0.44。单药灌注组B组(Endostar灌注组)与C组(DDP灌注组)、D组(PA-MSHA灌注组)之间无统计学差异(P值均大于0.05)。联合用药A组(Endostar+DDP灌注组)与E组(Endostar+DDP+PA-MSHA灌注组)比较,两者之间无统计学差异(P=0.85)。(4)阴性对照组F组死亡标本解剖见典型胃癌转移瘤特征,类似人胃癌腹腔广泛转移终末期表现。与其他组比较,E组(Endostar+DDP+PA-MSHA组)腹腔转移程度较轻。有Endostar药物灌注组(包括A、B、E组)出现肝转移较少,转移结节较小,其余组死亡标本时解剖大致与阴性对照组一致。(5)实验动物死亡标本ePCI评分情况:F组评分最高18.00±1.55分,E组评分最低12.00±1.79分。F组(阴性对照组)与A、B、C、D、E组之间ePCI评分两两比较均有统计学差异(P值分别为0.020,0.003,0.002,0.000,0.000)。E组(三药联用腹腔灌注组)与A、B、C、D、F组之间ePCI评分两两比较也均有统计学差异(P值分别为0.000,0.001,0.002,0.020,0.000)。其余各组间ePCI评分两两比较无统计学差异。(6)实验动物死亡标本腹腔内粘连评分情况:F组评分最高3.67±0.52分,E组评分最低1.17±0.75分。F组(阴性对照组)与A、B、C、D、E组之间ePCI评分两两比较均有统计学差异(P值分别为0.000,0.000,0.000,0.001,0.000)。E组(三药联用腹腔灌注组)与B、C、D、F组之间ePCI评分两两比较也均有统计学差异(P值分别为0.004,0.001,0.000,0.000)。其余各组间ePCI评分两两比较无统计学差异。(7)各组腹腔转移瘤标本之间VEGF表达的灰度值两两比较差异均具有统计学意义(P均小于0.05)。其中F组VEGF表达的灰度值(77.33±6.77)最低,提示其VEGF表达最强。E组VEGF表达的灰度值(200.17±4.26)最高,提示其VEGF表达最弱。各组实验动物死亡腹腔转移瘤标本之间PCNA表达的灰度值两两比较差异均具有统计学意义(P均小于0.05)。其中F组PCNA表达的灰度值(83.33±3.49)最低,提示其PCNA表达最强。E组PCNA表达的灰度值(184.83±3.76)最高,提示其PCNA表达最弱。结论:(1)本实验采用的肿瘤悬液注射法建立的兔VX-2胃癌腹腔转移瘤模型稳定,实验动物生存期长,能够为胃癌腹腔转移瘤诊疗提供稳定的实验研究基础。(2)腹腔恒温循环热灌注化疗是一种安全的恶性肿瘤治疗手段,不仅能杀灭肿瘤延长生命而且能减少腹腔粘连,改善生活质量。(3)DDP、Endostar、PA-MSHA三药联合应用于腹腔恒温循环热灌注起到了协同作用,可能机制是在肿瘤腹腔种植转移过程中通过下调PCNA、VEGF的表达起到阻断癌变的作用。其具体机制有待进一步研究。