猕猴桃果实B族维生素分析及其外源处理效应的研究

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猕猴桃(Actinidia.)果实是营养最全面的水果之一,其B族维生素种类丰富,但是B族维生素含量、代谢特性、最佳摄取时期及外源B族维生素处理对猕猴桃的影响鲜有报道。人体B族维生素极易流失,造成人体多种B族维生素缺乏症。通常补充B族维生素采用化学合成品,化学合成的B族维生素容易吸收过量,引起肝脏肾脏的代谢负荷过重,造成人体毒害。本论文以16个猕猴桃品种及2个野生种果实为试材,分析其发育期和冷藏过程中B族维生素含量变化;同时在猕猴桃生长过程中利用外源B族维生素处理猕猴桃叶片,分析猕猴桃果实B族维生素含量变化特性,以及果实成熟衰老过程中主要相关酶的变化。为了解B族维生素在猕猴桃果实中的分布和生理特性提供理论依据,为确定消费者摄取猕猴桃B族维生素的最佳时期和探讨外源B族维生素处理效应奠定基础。研究主要结果如下:1、建立了高效液相色谱法(HPLC)测定猕猴桃果实8种B族维生素的方法。在270nm和210 nm下双波长检测,等度洗脱,一个流程27 min,可有效分离和检测猕猴桃果实8种B族维生素,它们是硫胺素(B1)、核黄素(B2)、烟酸(B3)、泛酸(B5)、吡哆醇(B6)、生物素(B7)、叶酸(B9)和钴胺素(B12)。2、对猕猴桃生长发育期6个品种果实B族维生素进行分离测定,发现B族维生素含量高峰主要集中在盛花后第3到第6个时期,表明B族维生素在不同果实生长发育时期发挥不同的生理功能。对18个猕猴桃品系采后贮藏期果实B族维生素进行分析,如‘海沃德’、‘徐香’、‘红阳’等,发现在猕猴桃果实采摘期和后熟期B族维生素含量较低,冷藏一个月时B族维生素含量较高,并且B族维生素种类最多,表明冷藏一个月是最佳摄取猕猴桃果实B族维生素的时期。3、通过1 mg·L-1的外源B3处理‘海沃德’和‘徐香’猕猴桃,发现B3处理促进‘徐香’猕猴桃叶片叶绿素含量增加,对幼嫩叶片和果实组织的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(辅酶Ⅱ)含量有一定的促进作用,对成熟果实影响因品种而异。B3处理可以抑制‘海沃德’和‘徐香’H2O2生成,可以增加幼嫩组织的O生成,并且增加‘海沃德’过氧化氢酶(CAT)活性。B3处理对‘海沃德’和‘徐香’烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(辅酶Ⅰ)含量影响不大,对‘徐香’CAT活性影响不显著。B3处理后可以促进猕猴桃发育期果实B族维生素峰值提前出现,对成熟果内B族维生素含量无显著影响。结果表明B3处理可以增加‘海沃德’和‘徐香’抗氧化酶活性,对提高植物抗逆有一定作用。4、通过外源B2、B6和B9处理不同品种猕猴桃植株,发现2mmol·L-1的B2处理对‘金农2号’黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)有促进作用,对‘金香’FAD和黄素单核苷酸(FMN)促进作用不显著。1mg·L-1 B6处理对‘翠玉’叶片、‘徐香’果实和叶片的磷酸吡哆醛(PLP)含量增加有促进作用,对‘翠玉’果实PLP含量则无显著影响。处理对果实磷酸吡哆醛还原酶(PLR)活性高峰有促进的作用,其中‘翠玉’PLR活性促进作用集中在果实发育前期,而对‘徐香’的促进作用主要表现在后期,对‘徐香’和‘翠玉’叶片的PLR活性峰值出现有推迟的作用。此外,1mg·L-1 B6处理可促进猕猴桃果实贮藏中B族维生素含量增加。25mg·L-1B9处理‘金魁’和‘徐香’可以促进早期叶片叶绿素含量增加,促进果实B族维生素含量增加,促进‘金魁’果实和‘徐香’叶片中亚叶酸含量增加。结果表明三种维生素处理均能够促进猕猴桃果实B族维生素峰值提前,B6和B9可以用于增加采后猕猴桃果实内B族维生素含量。5、利用B1、B5、B7和B12处理不同品种猕猴桃植株,结果表明:1mg·L-1的B1对不同生长阶段的‘徐香’和‘翠玉’叶片丙酮酸脱氢酶(PDC)活性有一定的促进作用;6mg·L-1 B5能够促进‘翠玉’和‘徐香’叶片辅酶A(CoA)活性增加;1mg·L-1 B7处理促进‘金魁’和‘米良1号’丙酮酸羧化酶(PC)和乙酰辅酶A羧化酶(ACCcase)活性增加;1mg·L-1 B12处理抑制‘海沃德’和‘徐香’叶片可溶性蛋白质含量升高,对猕猴桃果实B族维生素含量没有影响。B5和B12能够促进猕猴桃发育期果实B族维生素峰值提前出现,B5、B7和B12对猕猴桃B族维生素峰值出现影响不显著。表明B5、B7和B12不适宜用于增强采后猕猴桃果实B族维生素。
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