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[目的]探讨大蒜素的主要成分二烯丙基三硫化物(Diallyl Trisulfide,DATS)对人肝癌HepG2细胞的抑制作用及其发挥作用可能的机制。[方法]1、将对数生长期的人肝癌细胞HepG2细胞随机分为空白对照组,DATS 组(10μM、20μM、40μM、8μM、160μM、320μM、640μM)。用CCK-8检测各对照组细胞的活性,使用克隆形成实验验证DATS对HepG2细胞的抑制生长作用,同时使用Hoechst染色细胞术技术检测DATS对肝癌HepG2细胞株的影响。2、选取空白对照组、DATS 40μM组、DATS 80μM组,对HepG2细胞进行培养48h,使用Western Blot技术检测Bax和Bcl-2的表达状况,使用Western Blot技术检测p-ERK的表达水平,同时检测AMPK和SIRT1的表达。所涉及实验数据使用SPSS19.0统计软件进行分析,Prism 7.0a和R语言作图,P<0.05时差异有统计学意义。[结果]1、在DATS对HepG2细胞的抑制作用实验中,CCK-8法测得结果示:10μM、20μM的DATS浓度对人肝癌细胞HepG2的抑制效果不明显(P>0.05),随着浓度的增高,DATS对HepG2的增值抑制效果更加明显,在浓度320μM、640μM时大片肝癌细胞死亡。在时间关系上,DATS浓度40μM、80μM、160μM的抑制效果48h效果较24h明显(P<0.05)。平板克隆形成实验示:DATS对HepG2细胞有抑制作用,加DATS组的细胞较空白组下降,且随着DATS浓度的升高细胞数随之下降,当DATS浓度到80μM时,已无细胞存在。Hoechst染色细胞术技术检测DATS对肝癌HepG2细胞株的影响,发现肝癌细胞凋亡发生显著变化,尤其是浓度为160μM的DATS处理24h后的HepG2细胞,其细胞凋亡率较空白对照组显著提高。2、在DATS对HepG2细胞的机制实验中,Western Blot结果显示:随着DATS的浓度的提高,细胞内的Bax表达逐步提高,而Bcl-2的表达则抑制,Bax/Bcl-2的比值上升。HepG2肝癌细胞空白对照组与HepG2肝癌细胞+DATS 40μM组的细胞的p-ERK/β-actin 比值无明显变化(P>0.05),HepG2肝癌细胞+DATS 80μM组的较HepG2肝癌细胞+DATS 40μtM组的p-ERK/β-actin比值有统计学意义(P<0.05),HepG2肝癌细胞+DATS 80μM组和HepG2肝癌细胞+40μM组相对比p-ERK/β-actin比值发现同样具有统计学意义(P<0.05)。AMPK/SIRT1的结果示:随着DATS的浓度升高,p-AMPK的表达水平上升,AMPK的表达水平下降以及SIRT1蛋白的表达水平上升。[结论]1、DATS对HepG2细胞具有抑制作用,且抑制作用呈剂量及时间依赖性。2、DATS对HepG2细胞抑制作用可能是通过Bax/Bcl-2通路、ERK通路和AMPK/SIRT1通路来发挥作用。