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BCAS2是雌激素受体的一种辅助转录激活因予,其表达量的变化会影响雌激素受体相关基因的转录活性。雌激素在哺乳动物卵泡发育中有重要的调控作用。目前关于BCAS2的研究主要集中在癌细胞系中,如乳腺癌细胞、Hela细胞等,而关于其在正常体细胞和生殖细胞内的功能研究报道还较少。因此,本研究以小鼠为实验动物模型,利用细胞免疫荧光、Western blot、Real-time PCR等实验技术,检测了BCAS2在小鼠卵巢组织中的定位和表达;利用RNA干扰技术对BCAS2在小鼠卵巢颗粒细胞内的功能做了初步的探索,结果如下: (1) BCAS2在小鼠颗粒细胞和卵母细胞中的表达和定位。细胞免疫荧光结果显示,BCAS2主要定位在颗粒细胞和卵母细胞的细胞核中。Western blot结果显示,BCAS2在小鼠GV-MⅡ期卵母细胞中的表达量逐步升高。在超数排卵处理后,PMSG注射后6h和12h卵巢中,BCAS2的表达水平显著高于其它时期(P<0.05)。Real-timePCR结果显示,BCAS2mRNA在腔前卵泡中的表达量显著高于有腔卵泡(P<0.05)。FSH可以促进体外培养颗粒细胞中BCAS2 mRNA的表达。 (2) RNAi干扰敲低BCAS2的表达对颗粒细胞增殖和凋亡的影响。在颗粒细胞中干扰BCAS2后,能显著性地降低了颗粒细胞的增殖水平(P<0.05),同时显著地下调增殖相关基因PCNA的表达(P<0.05),干扰BCAS2之后,促进颗粒细胞凋亡,并且抗凋亡基因BCL-2表达量显著下调,促凋亡基因BAX的表达量显著上调(P<0.05)。 综上,本研究发现BCAS2定位于小鼠颗粒细胞和卵母细胞的细胞核内,同时,BCAS2在不同发育时期的卵泡颗粒细胞中具有特殊的表达规律,颗粒细胞中干扰BCAS2之后,会显著降低细胞的增殖水平,并显著促进细胞凋亡,同时,显著性影响增殖和凋亡相关基因的表达,该结果说明BCAS2可能参与卵泡颗粒细胞增殖和凋亡的生理过程。