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茶树（Camellia sinensis（L.）O.Ktze）是我国重要的农业经济作物,但茶树病害的发生严重制约着茶叶产业的发展,茶树中抗病相关基因的发掘与鉴定有助于茶树抗性品种的选育及茶园病虫害绿色防控的实施。为挖掘茶树病害抗性基因,本文在前期研究采用图位克隆法从对茶树病害敏感的拟南芥突变体库中克隆获得两个新的病害抗性候选基因AtDEFL和AtMYB81的基础之上,采用瞬时表达法验证了其功能,进一步利用同源基因克隆法获得了茶树病害抗性候选基因CsDEFL,并对其功能进行验证,主要研究结果如下:1.通过RT-PCR技术克隆了AtDEFL和AtMYB81基因,将目的基因与植物载体PCXSN重组,构建了植物过表达载体PCXSN-AtDEF和PCXSN-AtMYB81,并转入农杆菌GV3101。采用稳定遗传表达法,将PCXSN-AtMYB81通过农杆菌介导转化了本氏烟草（Nicotiana benthamiana）,获得了转基因烟草T0代植株,为下一步的功能验证奠定了基础;采用农杆菌注射法,将AtDEFL通过农杆菌介导法在烟草中瞬时表达,抗病实验结果表明,过表达AtDEFL显著提高本氏烟草对烟草赤星病菌的抗性。2.通过基因序列比对,从茶树转录组数据库中获得了茶树CsDEF2基因序列并进行了生物信息学分析。结果表明,CsDEF2的开放阅读框（ORF）全长246bp,编码81个氨基酸,蛋白分子量8.68KD,等电点9.12。序列比对和系统发育分析表明,未发现有茶树等茶组植物中相关的序列与之同源,表明CsDEF2是新基因。CsDEF2编码的氨基酸序列与豆科（Leguminosae）的植物防御素氨基酸序列相似性较高,与藜豆（RDY09218.1）相似性为78%。氨基酸序列分析表明,CsDEF2氨基酸序列具有一个由8个半胱氨酸残基构成的硫堇结构域,三级结构由3股反向平行的β-折叠片和一个α螺旋组成CSαβ基序。3.采用RT-PCR法克隆了CsDEF2基因,并验证了其功能。对病原真菌诱导的茶叶中CsDEF2基因表达水平进行分析,发现茶树镰刀菌（Fusarium spp.）侵染后的叶片中CsDEF2基因的表达量明显上调,表明CsDEF2基因可能在防御真菌侵染发挥作用。为进一步验证该基因功能,构建了PCXSN-CsDEF2过表达载体并导入农杆菌GV3101中,通过农杆菌注射法将CsDEF2基因在本氏烟草中进行过表达,并进行了病原真菌接种实验,结果表明过表达CsDEF2显著提高了转基因烟草对病原菌的抗性,说明CsDEF2基因可能与茶树抗病相关。