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菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)是中国的传统名花,也是世界上最重要的观赏花卉之一。地被菊是菊花适于陆地栽培的一个品种群,其花色丰富,观赏性好,覆盖能力强,具有广阔的应用前景。但由于城市水资源的缺乏和盐渍化的日益严重,限制了地被菊的推广。通过根癌农杆菌介导的方法,将甜菜碱合成相关酶的基因PEAMT转入地被菊基因组中,培育出抗逆性更强的新品种,对地被菊在全国大面积推广,更好的为园林绿化服务具有重要意义。本研究获得的主要结果如下:1、建立了地被菊品种‘玉人面’、‘铺地金’的转化受体系统。以MS为基本培养基,采用6-BA和NAA两种激素9种不同配比的组合,从10个地被菊品种中筛选出‘玉人面’、‘铺地金’和‘北林红’3个高频再生品种,再生率分别为98%、96%和96%;‘玉人面’的再生培养基为:MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L;‘铺地金’的再生培养基为:MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L;‘北林红’的再生培养基为:MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L。同时还研究了不同的外植体类型,继代次数对再生的影响,叶片再生能力最高,但随着继代次数的增加,部分品种叶片再生能力有下降的趋势。研究了‘玉人面’和‘铺地金’对抗生素Kan的敏感性,结果表明7.5mg/L的Kan是菊花品种‘玉人面’叶片外植体筛选培养的临界耐受浓度,10mg/L的Kan是‘铺地金’叶片筛选培养的临界浓度;培养基中浓度为250mg/L的头孢霉素能够很好的抑制农杆菌的生长,且没有影响叶片外植体的再生率和不定芽数,可作为‘玉人面’和‘铺地金’的抑菌性抗生素。2、建立了地被菊‘玉人面’的遗传转化体系:以预培养12h的叶片为转化材料,用浓度OD600为0.4的携带有PEAMT基因的农杆菌菌液侵染10min,24℃共培养2d,延迟培养4d,用选择压为7.5mg/L的Kan连续筛选直至有不定芽生成。待不定芽长至1cm左右时转入附加20mg/L Kan的1/2MS生根培养基中,继续筛选,并对生根抗性植株进行了PCR和Southern blotting检测,103株生根抗性苗中,有9株呈PCR阳性反应,获得特异性扩增条带,其中4个被检植株产生Southern杂交信号,证明PEAMT基因已整合到地被菊基因组中,外源基因主要是单拷贝插入。3、从转入PEAMT基因的‘玉人面’株系中,选取生长正常的4个株系及非转