大鼠原位肝脏移植模型的建立和改良以及不同品系组合的大鼠肝移植排斥反应的比较

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背景和目的构建一个稳定而具有典型移植排斥反应的动物模型是肝脏移植研究的基础。大鼠原位肝脏移植模型是最常用的模型之一。本实验研究的目的就是建立改良的大鼠原位肝脏移植模型,并通过对不同品系大鼠肝脏移植模型的比较,探索理想的急性排斥模型,同时检测T细胞亚群在急性排斥反应中的表达。研究方法采用Kamada“双袖套法”建立大鼠原位肝脏移植模型,对术中供肝的分离、切取、灌注、植入以及术后的护理观察等方面进行改良;以大鼠SD(供体)→SD(受体)为对照组,建立Wistar→SD、Lewis→BN、DA→Lewis三种不同品系组合的大鼠肝脏原位移植排斥模型,在术后恢复情况、生存时间、肝功能、组织病理学等方面进行比较,探索最理想的急性排斥模型;流式检测T细胞亚群(CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD4~+CD25~+、NKT)在急性排斥反应中的表达。研究结果建立了改良的大鼠原位肝脏移植模型,手术简单易行,稳定可靠,可重复性高,大鼠术后恢复好;大鼠SD→SD属于同源耐受组合,Wistar→SD属于轻度或不明确性排斥反应组合,虽然Lewis→BN、DA→Lewis组合都发生了明显的急性排斥反应,但DA→Lewis组合是最理想的急性排斥反应模型;与耐受组比较,急性排斥反应受体外周血CD3~+及CD3~+CD4~+表达较多,CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值较高,脾脏和淋巴结中NKT细胞表达较多,而CD4~+CD25~+的表达无统计学差异。研究结论改良后的大鼠原位肝脏移植模型简单易行、稳定可靠;大鼠DA→Lewis组合是理想的急性排斥模型;大鼠急性排斥反应的发生可能与受体效应性T细胞亚群CD4/CD8比例的上调以及NKI调节性T细胞亚群的下调有关。本研究为进一步研究大鼠移植排斥反应的机制和移植免疫耐受的诱导打下了一定的基础。
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