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微小RNA(miRNAs)是一类大约22个碱基长的非编码RNA。miRNA通过与mRNA的3’UTR结合类抑制mRNA翻译或造成mRNA降解。越来越多的研究已经证明miRNA参与细胞的增殖,分化和凋亡等生物过程。因此miRNA的异常表达与癌症有关。肺癌是目前致死率最高的癌症,越来越多的报道证明肿瘤的发生和发展与miRNA相关,考虑到人基因组中存在许多miRNA,我们决定在肺癌病人的肿瘤组织和正常非组织中检钡miRNA表达谱。我们发现共有31个miRNA呈低表达。为了进一步确认这些niRNA在肺癌细胞增殖中的作用,我们进行了第二轮筛选,将这些miRNA转染肺癌细胞系A549和H460,我们发现niR-545能够显著地抑制A549和H460细胞增殖。于是我们研究miR-545抑制细胞增殖的机制。我们同过EdU掺入实验发现miR-545能够抑制细胞DNA合成。因此我们认为niR-545有可能影响细胞周期。我们通过细胞周期检测发现miR-545能够引起细胞周期阻滞在G0/G1期。此外,我们还发现niR-545在A549细胞中能够促进细胞的凋亡。进而我们研究了1miR-545造成细胞周期阻滞的机制。我们使用targetscan预测miR-545靶基因,发现与细胞周期相关的cyclin D1和CDK4是miR-545的靶基因。我们发现miR-545能在A549和H460细胞系中抑制cyclin D1和CDK4的翻译,而在HFL1细胞系中,抑制miR-545可以促进cyclin D1和CDK4表达。另外双报告实验表明miR-545通过结合cyclin D1和CDK4的3’UTR来抑制这两个基因的翻译。这说明cyclin D1和CDK4是miR-545的靶基因。另外我们通过siRNA抑制cyclin D1和CDK4,引起细胞增殖抑制,细胞周期阻滞在G1期,并造成细胞凋亡。这说明niR-545是通过抑制cyclin D1和CDK4的表达来抑制细胞增殖的。另外我们还发现miR-545基因的启动子区域含有CpG岛,这意味着miR-545的表达有可能受到启动子甲基化的调控,但是我们后续的实验未证明miR-545表达受启动子甲基化调控。