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目的：近年来的研究显示急性脊髓损伤（acute spinal cord injury,ASCI）后的继发性组织损害与继发性炎症反应密切相关。ASCI后多种炎症蛋白基因被激活并获得表达，诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide,iNOS）是其中的一种并进一步催化合成过量的一氧化氮(nitric oxide ,NO)。已经证实，生理条件下的NO能够起到扩张血管、增加血流量、抑制血小板和白细胞的聚集和黏附等保护作用，而过量的NO却具有细胞毒和神经毒性作用，能够介导多种炎性病变和神经退行性病变中的细胞死亡。为此了解iNOS在ASCI后的表达规律，对阐明iNOS在急性脊髓损伤后的继发性炎症反应中的作用意义重大。故本研究采用大鼠的脊髓损伤模型，通过应用免疫组织化学方法和免疫印迹法（Western blot analysis）观察iNOS在脊髓损伤后的表达趋势，同时继续应用胆囊收缩素-8肽（CCK-8）进行干预性治疗，进一步验证其抗脊髓损伤的治疗作用。材料与方法：将120只健康、体重200g-250g的SD大鼠（雌雄不限），随机分为四组，即正常对照组、损伤组、生理盐水组和CCK-8治疗组各30只。应用1%戊巴比妥钠（35mg/kg）进行腹腔麻醉，然后将大鼠腹卧于立体定向架上。所有大鼠先行后正中入路T8-9椎板切除（保留硬脊膜）。除正常对照组外，其余三组大鼠使用OHBA SIKI打击器<WP=4>（Tokyo,Japan）按Gruner改良法作成T9脊髓背侧损伤模型，打击强度为25势能克厘米（Vgram-cm force, gcf），并于打击前向生理盐水对照组和CCK-8治疗组大鼠自尾静脉分别注入生理盐水及胆囊收缩素八肽（CCK-8 40ug/kg）0.2ml。对各组大鼠分别于伤后4h、1天、3天、7天、14天各时间点进行运动学评分并各处死6只，其中3只大鼠开胸经主动脉灌注4%多聚甲醛400ml后处死，取出距损伤中心区上下各0.5cm两段脊髓继续应用4%多聚甲醛固定48小时，制作蜡块、切片，进行免疫组织化学检察；将另外3只大鼠在直视下取出以损伤区为中心的1cm脊髓，放入低温冰箱-70℃冷冻保存进行iNOS的Western blot analysis。应用华东理工大学自动化所细胞免疫组织化学分析系统Version 2.0自动分析记录切片中阳性细胞的百分率；应用AlphalmagerTM 1220 Documentation & Analysis system V5.50对iNOS 在Western blot中的结果进行分析。所有数据用均数±标准差（±s）表示，应用SPSS10.0软件对结果进行统计分析，与对照组比较采用t检验，组间比较采用F检验，检验标准采用P < 0.05。 结果：1 运动评分：按照改良Tarlov评分标准显示所有手术动物麻醉清醒后及伤后4h评分均为0；伤后1天、3天、7天和14天评分分别为0.42±0.40、0.68±0.46、1.32±0.38和2.53±0.35，评分逐渐增高。各组之间比较1天与3天为P>0.05、3天与7天为p<0.05、7天与14为p<0.01。盐水组大鼠1天、3天、7天和14天评分分别为0.40±0.36、0.78±0.47、1.34±0.34和2.38±0.40，与损伤组相比无统计学意义，P>0.05。CCK-8治疗组相同时间点评分分别为<WP=5>0.50±0.38、0.65±0.42、1.37±0.39和2.60±0.42，与损伤组和盐水组相比无统计学意义，P>0.05。2 免疫组化结果：① 在正常脊髓组织标本中可见iNOS有微量表达，阳性细胞百分率为（4.34±1.15%），伤后4h表达量无明显变化，阳性细胞百分率为（4.73±1.18%），与正常对照组相比无统计学意义（P>0.05）。脊髓损伤后1天iNOS逐渐增高，阳性细胞百分率（9.03±3.73%），与对照组相比有显著性差异（p<0.05）。伤后7天其表达最强（47.57±8.62%），iNOS的免疫反应可在神经元、星形胶质细胞、血管内皮细胞等都可探测到。伤后3天和14天表达量分别为22.98±6.36%和39.39±6.43%，与正常对照相比均有显著性差异（p<0.01）。② 盐水对照组，经尾静脉注入生理盐水后于伤后4h、1天、3天、7天和14天测得iNOS的表达量分别为4.88±1.21%、8.84±3.58%、21.36±6.89%、47.21±9.50%和39.43±8.56%，与损伤组相同的时间点相比无显著性差异（P>0.05）。③ CCK-8治疗组，经尾静脉注入CCK-8（40ug/kg，总量为0.2ml）后于伤后4h表达为4.65±1.25%，与损伤组和盐水组相比无明显差异（P＞0.05）；伤后1天表达为6.37±2.13%，与损伤组和盐水组相比有统计差异（P<0.05）；伤后3天、7天和14天测得iNOS的表达量分别为20.72±5.98%、44.13±8.37%和38.19±6.13%，与损伤组及盐水组相同的时间点相比无明显差异，P>0.05。 3 Western blot analysis：① 在正常脊髓组织标本中iNOS的面积灰度值（230±38.53），伤后4h表达量无明显变化面积灰度值为（248±42.46），与正常对照组相比无统<WP=6>计学意义（P>0.05）。脊髓损伤后1天iNOS胞浆蛋白的表达量逐渐增高（822±140.68），与对照相比有显著性差异（p<0.05）。伤后7天其表达最强（3506±641.76），伤后3天和14天表达量分别为2327±489.45和2825±455.71，与正常对照组相比均有显著性差异（p<0.01）。② 盐水对照组，经尾静脉注入生理盐水后于伤后4h、1天、3天、7天和14天测得iNOS面积灰度值分别为236±36.58 、802±136.04、2365±288.00、3354±373.91和2914±321.37，与损伤组相同的时间点相比无显著性差异（P>0.05）。③ CCK-8治疗组，经尾