禽流感是目前影响世界养禽业的最严重的疫病之一。血凝素(HA)是禽流感病毒重要的结构蛋白,是诱导体液免疫的关键靶抗原。研究表明HA1的免疫原性和抗原性强于HA2。 本研究利用RT-PCR技术扩增H7亚型禽流感病毒的HA1基因,并将PCR产物连接到克隆载体pMD 18-T Simple vector。然后转化大肠杆菌。测序结果表明所克隆的片断大小为1035bp。将HA1基因序列通过NCBI Blastn分析,与已发表的其它流感病毒核酸序列的同源性在91.22%-99.52%范围内。 将HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,经酶切和PCR鉴定,证明成功构建了重组表达载体pGEX-HA1。将构建好的融合表达载体在IPTG的诱导下在大肠杆菌中得到了表达。融合蛋白GST-HA1的分子量约为63kD。经Western-Blot分析,融合蛋白与H7亚型禽流感阳性血清发生特异性反应,说明该重组蛋白有良好的抗原活性。