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本文以NOD/SCID小鼠为模型,评价体外扩增后的造血干细胞在体内的植入和造血重建能力,考察扩增后造血干细胞移植的效果和可行性,为今后体外扩增的造血干细胞应用于临床提供实验依据。
本文首先比较了CD34<+>细胞和CD34<+>细胞在体内的植入和造血重建能力,考察了脐血中CD34<+>细胞对CD34<+>细胞在体内重建造血能力的影响。分别从新鲜的和培养后的脐血细胞中分离出CD34<+>细胞和CD34<->细胞,按不同组分输入NOD/SCID小鼠体内,饲养6周后处死存活的小鼠,取其骨髓、脾脏和外周血细胞,分别进行细胞表型分析、集落和人特异性基因的检测。结果显示,CD34<+>细胞具有良好的体内植入和重建多系造血的能力,而CD34<->细胞基本不具备重建造血能力,并且对CD34<+>细胞在小鼠体内的植入没有起到显著的促进作用。
在上述实验的基础上,以MNC和富集的CD34<+>细胞作为起始细胞,考察不同细胞因子组合对造血干细胞体外扩增的影响,并对扩增后的造血干细胞的生理功能进行了检测。研究表明,富集的CD34<+>细胞作为造血干细胞体外扩增的起始细胞比MNC更具优势,细胞因子组合STF比STF36更有利于造血干细胞的扩增,且扩增后的造血干细胞都能在小鼠体内植入,并能够帮助小鼠重建造血。起始细胞和细胞因子组合不同并没有对培养后造血干细胞的体内植入和重建造血功能产生显著影响。