甲磺隆和直链烷基苯磺酸盐及其降解产物多克隆抗体的制备

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为了建立测定磺酰脲除草剂甲磺隆(Metsulfuron-methyl)残留的酶联免疫吸附检测方法(Enzyme linked immunosorbent assay,简称ELISA),以邻甲酸甲酯苯磺酰胺与琥珀酸酐反应合成了半抗原1-[(2-甲酸甲酯)苯磺酰]单胺琥珀酸。以核磁共振H1NMR、薄层色谱、熔点测定鉴定所制半抗原的化学结构。用活性酯化法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原,并以紫外光谱进行鉴定。用抗原免疫新西兰大白兔获得了甲磺隆的多克隆抗体,以包被原进行包被进行间接ELISA法实验,由方阵滴定确定了包被原的最佳包被浓度为100 ng/mL,此浓度下抗血清的工作浓度(即效价)为1:800000。以此抗体建立的间接竞争ELISA法,得出检测甲磺隆的线性范围在0.7~40 mg/L,最低检测限为0.16 mg/L。与甲磺隆结构相似的磺酰脲类除草剂的交叉反应结果表明,氯嘧磺隆的交叉反应率为38.2%,其他4种除草剂(吡效隆、噻磺隆、胺苯磺隆和氯磺隆)的交叉反应率都小于1%。在分别对检测甲磺隆浓度为0.5和5 mg/L的甲醇影响的实验中,检测样本溶液中添加5~20%的甲醇溶液。结果表明,随着甲醇含量的增加,抗体对甲磺隆的抑制能力不断减弱,但20%内的甲醇含量对检测效果的影响不大。本研究为建立甲磺隆残留免疫分析方法奠定了基础。   阴离子表面活性剂直链烷基苯磺酸盐(Linear alkylbenzene sulfonates,简称LAS)及其降解产物磺基苯羧酸(Sulfophenyl carboxylic acids,简称SPC)共同对环境造成了一定危害。根据LAS和SPC的共同结构磺基苯,制备了抗LAS和SPC的多克隆抗体。通过磺化4-苯基丁酸合成了4C-SPC作为半抗原,并以红外、核磁共振H1NMR鉴定所制半抗原的化学结构。用活性酯化法将半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原。通过免疫新西兰大白兔获得抗LAS和SPC的多克隆抗体,以此抗体建立的间接竞争ELISA法对十二烷基苯磺酸钠和半抗原4C-SPC的检测限分别为ppb和ppm级。本研究为建立LAS和SPC残留免疫分析方法奠定了基础。
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