温度敏感型脂质体的制备及其释放性能研究

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添加于滤嘴中的温敏型包埋制剂是卷烟加香加料研究的重点难点。采用温度敏感型脂质体作为载体不仅能利用温度的变化控制芯材释放,而且能显著提高包埋物的稳定性。β-紫罗兰酮是卷烟中一种重要的香味化合物,具有较强的挥发性,贮藏过程中易散失。因此本论文以β-紫罗兰酮为模型芯材,制备了温敏脂质体,并对其制备工艺、配方和释放性能进行了研究。首先建立曲拉通100破乳-高效液相色谱法(HPLC)来分析脂质体中β-紫罗兰酮总量。曲拉通100作为增溶剂可将包埋在脂质体双分子层中的芯材有效释放。在选定色谱条件下,β-紫罗兰酮和辅料可以被完全分离,β-紫罗兰酮在5~80 mg/L的浓度范围内线性关系良好(R2=0.9998),日内日间精密度(RSD)均小于3%。脂质体和游离β-紫罗兰酮的分离可采用反透析法或超速离心法,两种方法的平均回收率分别为100.36%和97.31%,RSD均小于3%。但与超速离心法相比,反透析法更加准确、经济,故优选反透析-HPLC法。使用此法测得β-紫罗兰酮脂质体的包封率为52.76%±1.10%。以包封率及粒径为指标,通过比较薄膜超声法和乙醇注入法,确定采用前者制备β-紫罗兰酮脂质体。并研究了超声条件、磷脂种类及配比、磷脂浓度、β-紫罗兰酮载量、吐温80加入量对脂质体相变温度和包埋效果的影响。优化得到的较佳制备工艺参数为:超声功率240 W,超声时间4 min;较优配方为:二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)与氢化大豆卵磷脂(HSPC)摩尔比为8:2,磷脂浓度10 mg/m L,β-紫罗兰酮与吐温80、磷脂的质量比为1:1:20或5:2:40。该条件下制备的脂质体包封率为60.62%±3.48%,PDI<0.3,在AFM原子力显微镜的观察下为球状或近似球状的小囊泡。进一步考察不同载量β-紫罗兰酮脂质体的理化稳定性及释放特性。低温4℃贮存过程中,β-紫罗兰酮脂质体的稳定性和其载量相关。运用荧光探针、拉曼光谱研究了β-紫罗兰酮与脂质分子的相互作用,结果显示当β-紫罗兰酮的载量较低时(1%、2%),能显著提高脂质体双分子层的微粘度及磷脂分子之间排列的橫向有序性,降低双分子层的流动性,保持贮存过程中脂质体的稳定性。但当载量较高时(10%),过量的β-紫罗兰酮会破坏双分子膜结构,导致β-紫罗兰酮脂质体的稳定性下降。GC-MS测定结果表明,β-紫罗兰酮的载量还会对温敏脂质体的释放性产生影响。与载量2%的脂质体仅释放少量β-紫罗兰酮相比,载量为5%的β-紫罗兰酮脂质体在短时间内释放量较高。这主要是由于β-紫罗兰酮与磷脂分子相互作用,影响脂质体的相转变过程,导致双分子膜在液晶态时的无序性增加,流动性增大。卷烟滤嘴加香试验也证明β-紫罗兰酮脂质体可达到理想的温敏释放控制效果。
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