论文部分内容阅读
目的探讨单独及联合使用2-DG及3-BrPA对大肠癌细胞的增殖抑制作用机制。方法单独使用梯度浓度的2-DG及3-BrPA作用于大肠癌细胞，或两种药物联用，另设阴性对照组(加等体积培养基)，培养条件包括常氧及乏氧状态。MTT法检测不同浓度2-DG及3-BrPA对常氧及厌氧状态下大肠癌细胞增殖抑制情况。Western Blot方法检测实验大肠癌细胞在常氧及乏氧状态下HIF-1α的表达情况，检测乏氧状态下不同浓度2-DG及3-BrPA或两药联用作用下HIF-1α及HK-II的表达情况。使用ATP试剂盒检测单独使用不同浓度2-DG及3-BrPA或两药联用作用下常氧及厌氧环境中大肠癌细胞ATP的生成情况，并检测细胞生成延胡索酸及乳酸量的变化。结果常氧及厌氧条件下，单独使用2-DG及3-BrPA对大肠癌细胞增殖均具有明显的抑制作用，当单独使用2-DG浓度达18mM时细胞的生存率降低至30%左右，3-BrPA浓度达400μM时大肠癌细胞的生存率亦降低至30%左右，统计分析显示具有统计学差异，联合使用上述两种药物增殖抑制作用更加明显。Western Blot检测发现在2-DG及3-BrPA作用下大肠癌细胞中HIF-1α、HK-II表达量明显减少，联合使用上述两种药物时蛋白表达量降低明显。单独或联合使用2-DG及3-BrPA均降低了大肠癌细胞中ATP及乳酸生成量，同时增加了延胡索酸的生成量。结论2-DG及3-BrPA通过抑制大肠癌细胞糖酵解恢复葡萄糖有氧代谢发挥增殖抑制作用。2-DG及3-BrPA通过降低HIF-1及糖酵解关键酶表达抑制大肠癌细胞糖酵解。