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目的：
本研究以自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat, SHR)为研究对象，运用尾套法、酶联免疫吸附法(Elisa)、蛋白免疫印迹法(Western-Blot)、实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativepolymerasechainreaction)等方法，从Ghrelin调控的PI3K/Akt/eNOS信号转导通路介导的内皮保护的角度入手，从正、反向研究电针阳明经穴对SHR大鼠血压、内皮功能、Ghrelin及PI3K/Akt/eNOS信号转导通路的影响，探讨从阳明论治高血压的作用机制。
方法：
选择SPF级的SHR大鼠32只和正常血压大鼠(Wistar Kyoto, WKY)8只，8周龄，雄性，体重200-250克，自由进食、饮水。WKY大鼠8只为正常血压组(WKY组)，32只SHR大鼠按随机数字表法，随机分为自发性高血压组(SHR组)、电针阳明组(EA组)、电针阳明+Ghrelin组(EA+G组)、电针阳明组+Ghrelin阻断剂组(EA+A组)。SHR组及WKY组不给予任何治疗，每日只捆绑束缚20min，每周5次，共连续4周，其余组均接受每周5次，每次20min，连续4周的电针治疗。EA+G和EA+A组于针刺前1小时，腹腔注射相应阻断剂或激活剂。各组大鼠均采用尾套法测量不同时段大鼠血压。针刺4周后放血处死大鼠，取腹主动脉进行实验。运用HE染色观察腹主动脉的病理形态学变化；Elisa检测大鼠血清中Ghrelin、NO、ET-1以及TXA2的浓度；Western-Blot蛋白印迹检测腹主动脉PI3K、p-Akt、Akt、eNOS的蛋白表达；实时荧光定量PCR检测PI3K、Akt、eNOS的mRNA的表达差异。
结果：
1.基线分析
WKY组、SHR、EA组、EA+G组和EA+A组各组间基线齐，具有可比性。
2.血压结果：
(1)组内结果：
SHR组治疗前后SBP无统计学差异(p＞0.05)，治疗后DBP较治疗前升高且差异具有统计学意义(p＜0.05)；EA组、EA+G组治疗后SBP、DBP较治疗前均降低，且差异具有统计学意义(p＜0.05)。
(2)组间结果：
治疗前：与WKY组相比，其余各组SBP、DBP均升高，差异具有统计学意义(p＜0.01)；与SHR组相比，EA组、EA+G组和EA+A各组间无统计学差异(p＞0.05)；
治疗后：与SHR组相比，EA组SBP、DBP均下降(p＜0.05)；与EA组相比，EA+G组的SBP、DBP值均下降，差异具有统计学意义(p＜0.05)，EA+A组的SBP值升高，差异具有统计学意义(p＜0.05)，DBP无统计学差异(p＞0.05)。
3.HE染色结果：
WKY组大鼠血管结构完整；SHR组大鼠血管大量内皮细胞脱落，血管内壁不光滑，受损严重；EA组、EA+G组、EA+A组大鼠在经过4周的电针治疗后，血管内皮细胞少量脱落，血管壁受损程度减轻，提示电针阳明经穴可以一定程度上改善血管内皮形态。
4.Elisa结果：
与WKY组，SHR组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度降低(p＜0.05)，ET-1、TXA2浓度有所升高，差异有统计学意义(p＜0.05)；
与SHR组相比，EA组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度升高(p＜0.05)，ET-1、TXA2浓度降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)；
与EA组相比，EA+G组大鼠血清中Ghrelin浓度升高(p＜0.05)，而EA+G组大鼠血清中NO浓度无明显改变(p＞0.05)，EA+G组大鼠血清中ET-1、TXA2浓度降低，差异有统计学意义(p＜0.05)；
与EA组相比，EA+A组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度降低(p＜0.05)，TXA2浓度升高(p＜0.05)，ET-1浓度有所升高，但差异无统计学意义(p＞0.05)。
5.Western-Blot结果：
与WKY组相比，SHR组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS蛋白的表达降低(p＜0.05)；
与SHR组相比，EA组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS的蛋白表达升高(p＜0.05)；
与EA组比较，EA+G组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS蛋白表达升高，而EA+A组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值及eNOS的蛋白表达降低，具有统计学差异(p＜0.05)，提示电针阳明经穴可以激活PI3K/Akt/eNOS信号通路，上调PI3K/Akt/eNOS的蛋白表达。
6.qRT-PCR结果：
与WKY组相比，SHR组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达明显降低(p<0.05)；
与SHR组相比，EA组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达升高(p＜0.05)；
与EA组比较，EA+G组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达升高，而EA+A组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达降低(p＜0.05)。
结论：
1.电针阳明经穴可以降低SHR大鼠血压。
2.电针阳明经穴可以减轻血管壁受损程度，降低血管内皮细胞脱落程度，保护血管内皮。
3.电针阳明经穴可以促进胃肠分泌Ghrelin，激活PI3K/Akt/eNOS信号通路，调节NO的浓度，降低ET-1、TXA2水平，发挥内皮保护作用，这可能是电针阳明经穴的降压机制之一。
本研究以自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat, SHR)为研究对象，运用尾套法、酶联免疫吸附法(Elisa)、蛋白免疫印迹法(Western-Blot)、实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativepolymerasechainreaction)等方法，从Ghrelin调控的PI3K/Akt/eNOS信号转导通路介导的内皮保护的角度入手，从正、反向研究电针阳明经穴对SHR大鼠血压、内皮功能、Ghrelin及PI3K/Akt/eNOS信号转导通路的影响，探讨从阳明论治高血压的作用机制。
方法：
选择SPF级的SHR大鼠32只和正常血压大鼠(Wistar Kyoto, WKY)8只，8周龄，雄性，体重200-250克，自由进食、饮水。WKY大鼠8只为正常血压组(WKY组)，32只SHR大鼠按随机数字表法，随机分为自发性高血压组(SHR组)、电针阳明组(EA组)、电针阳明+Ghrelin组(EA+G组)、电针阳明组+Ghrelin阻断剂组(EA+A组)。SHR组及WKY组不给予任何治疗，每日只捆绑束缚20min，每周5次，共连续4周，其余组均接受每周5次，每次20min，连续4周的电针治疗。EA+G和EA+A组于针刺前1小时，腹腔注射相应阻断剂或激活剂。各组大鼠均采用尾套法测量不同时段大鼠血压。针刺4周后放血处死大鼠，取腹主动脉进行实验。运用HE染色观察腹主动脉的病理形态学变化；Elisa检测大鼠血清中Ghrelin、NO、ET-1以及TXA2的浓度；Western-Blot蛋白印迹检测腹主动脉PI3K、p-Akt、Akt、eNOS的蛋白表达；实时荧光定量PCR检测PI3K、Akt、eNOS的mRNA的表达差异。
结果：
1.基线分析
WKY组、SHR、EA组、EA+G组和EA+A组各组间基线齐，具有可比性。
2.血压结果：
(1)组内结果：
SHR组治疗前后SBP无统计学差异(p＞0.05)，治疗后DBP较治疗前升高且差异具有统计学意义(p＜0.05)；EA组、EA+G组治疗后SBP、DBP较治疗前均降低，且差异具有统计学意义(p＜0.05)。
(2)组间结果：
治疗前：与WKY组相比，其余各组SBP、DBP均升高，差异具有统计学意义(p＜0.01)；与SHR组相比，EA组、EA+G组和EA+A各组间无统计学差异(p＞0.05)；
治疗后：与SHR组相比，EA组SBP、DBP均下降(p＜0.05)；与EA组相比，EA+G组的SBP、DBP值均下降，差异具有统计学意义(p＜0.05)，EA+A组的SBP值升高，差异具有统计学意义(p＜0.05)，DBP无统计学差异(p＞0.05)。
3.HE染色结果：
WKY组大鼠血管结构完整；SHR组大鼠血管大量内皮细胞脱落，血管内壁不光滑，受损严重；EA组、EA+G组、EA+A组大鼠在经过4周的电针治疗后，血管内皮细胞少量脱落，血管壁受损程度减轻，提示电针阳明经穴可以一定程度上改善血管内皮形态。
4.Elisa结果：
与WKY组，SHR组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度降低(p＜0.05)，ET-1、TXA2浓度有所升高，差异有统计学意义(p＜0.05)；
与SHR组相比，EA组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度升高(p＜0.05)，ET-1、TXA2浓度降低，差异具有统计学意义(p＜0.05)；
与EA组相比，EA+G组大鼠血清中Ghrelin浓度升高(p＜0.05)，而EA+G组大鼠血清中NO浓度无明显改变(p＞0.05)，EA+G组大鼠血清中ET-1、TXA2浓度降低，差异有统计学意义(p＜0.05)；
与EA组相比，EA+A组大鼠血清中Ghrelin、NO浓度降低(p＜0.05)，TXA2浓度升高(p＜0.05)，ET-1浓度有所升高，但差异无统计学意义(p＞0.05)。
5.Western-Blot结果：
与WKY组相比，SHR组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS蛋白的表达降低(p＜0.05)；
与SHR组相比，EA组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS的蛋白表达升高(p＜0.05)；
与EA组比较，EA+G组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值和eNOS蛋白表达升高，而EA+A组腹主动脉中PI3K、p-Akt/Akt比值及eNOS的蛋白表达降低，具有统计学差异(p＜0.05)，提示电针阳明经穴可以激活PI3K/Akt/eNOS信号通路，上调PI3K/Akt/eNOS的蛋白表达。
6.qRT-PCR结果：
与WKY组相比，SHR组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达明显降低(p<0.05)；
与SHR组相比，EA组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达升高(p＜0.05)；
与EA组比较，EA+G组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达升高，而EA+A组腹主动脉中PI3K、Akt、eNOS的mRNA表达降低(p＜0.05)。
结论：
1.电针阳明经穴可以降低SHR大鼠血压。
2.电针阳明经穴可以减轻血管壁受损程度，降低血管内皮细胞脱落程度，保护血管内皮。
3.电针阳明经穴可以促进胃肠分泌Ghrelin，激活PI3K/Akt/eNOS信号通路，调节NO的浓度，降低ET-1、TXA2水平，发挥内皮保护作用，这可能是电针阳明经穴的降压机制之一。