【摘 要】
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目的探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)迁移能力的影响及其机制。方法提取、培养和鉴定大鼠骨髓EPCs;重组腺病毒载体介导c-Met基因转染EPCs,
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目的探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)迁移能力的影响及其机制。方法提取、培养和鉴定大鼠骨髓EPCs;重组腺病毒载体介导c-Met基因转染EPCs,运用Real-time PCR、Western blot和CCK8分别检测c-Met的表达和细胞增殖;分别用0、5、10、20和50ng/mL HGF处理Ad-c-Met-EPCs,并通过Transwell迁移系统检测Ad-c-Met-EPCs的迁移能力;选取适宜浓度的HGF处理EPCs、Ad-GFP-EPCs和Ad-c-Met-EPCs,并设置PBS对照组和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002组(同时加入HGF和10mg/mL的LY294002),通过Transwell迁移系统和Western blot分别检测各组细胞的迁移能力和Akt、P-Akt的表达情况。结果(1)Ad-c-Met-EPCs中c-Met基因与蛋白均为高表达(P<0.05)。(2)c-Met基因对EPCs的增殖无明显影响。(3)HGF在0-50ng/mL范围内呈浓度依赖性促进Ad-c-Met-EPCs迁移。(4)HGF+Ad-c-Met-EPCs组的迁移能力和P-Akt的表达显著高于对照组、HGF+EPCs组、HGF+Ad-GFP-EPCs组和HGF+LY294002+Ad-c-Met-EPCs组(P<0.05)。结论HGF/c-Met能够显著提高EPCs的迁移能力;HGF/c-Met可能通过PI3K/Akt信号通路促进EPCs的迁移。
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