新型抗真菌抗生素的发酵生产及分离工艺的研究

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本文研究从一株不吸水链霉菌Streptomyces ahygroscopicus ZU-1的发酵液中分离出一种新型抗真菌抗生素,确定了一条较为合理的抗生素发酵生产和分离纯化的工艺路线。通过单因素法对菌种的发酵工艺条件进行了优化,优化后的培养条件是:初始pH 7.0、培养温度30℃、接种量10%、摇瓶装液量40ml/250ml、培养时间72小时。20L发酵罐的发酵动力学规律表明,产抗水平在48h左右达到最大。本文对抗生素可能存在的理化性质作了简单的探讨,结果表明该抗生素具有较高的热稳定性,在酸、中性环境下比较稳定,碱性环境下不稳定。纸层析和纸电泳结果表明,该抗生素可能是一种酸性水溶性抗生素。紫外扫描发现该抗生素在298nm处有明显吸收峰。抑菌实验表明该抗生素对白念珠菌具有很强的抑菌力,离子交换后的抗生素粗品最小抑菌浓度达到0.3906μg/mL。本文采用现代分离技术将抗生素从发酵液中提取分离出来。氯仿萃取后,实验采用大孔吸附柱层析和离子交换柱层析等方法对发酵产物进行了分离纯化。优化后大孔吸附工艺为:pH为4的上柱液以2BV/h的流速上柱:80%的乙醇溶液以1BV/h的流速洗脱;优化后离子交换工艺为:pH为2的上柱液以2BV/h的流速上柱;去离子水冲洗后,用0.6mol/L的氨水以1BV/h的流速洗脱,发现抗生素有三种主要成分。制备高效液相色谱精纯后,P-1样品纯度达到97%以上
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