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目的: 研究降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠坐骨神经结扎模型表达的时空变化规律,探讨其变化的意义。
方法: 健康成年SD大鼠99只,随机分为正常对照组、假手术组和坐骨神经结扎组,后者根据存活时间再分为1、3、5、7、14、21和28天组(各组n=11)。用原位杂交、免疫组织化学方法检测CGRP在坐骨神经、脊神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓的表达变化;Western blot进行定量测定。同时用免疫组织化学方法观察NGF在坐骨神经结扎部位的变化。
结果:(1).正常对照组大鼠DRG与脊髓前、后角神经元内均有CGRP mRNA表达;CGRP蛋白质表达主要分布于DRG感觉神经元、脊髓前角运动神经元和后角Ⅰ、Ⅱ层。假手术组与正常对照组结果基本一致。(2).坐骨神经结扎后术侧DRG内的CGRP mRNA表达5天开始下调,持续至28天时仍低于正常;术后7天DRG内CGRP蛋白开始下降,28天仍低于正常,同时CGRP阳性细胞数目显著减少(P<0.05)。Western blot检测肯定了免疫染色的结果。(3).结扎后术侧脊髓后角神经元的CGRP mRNA表达7、14天下调,21天时恢复正常;CGRP蛋白14天表达下降,21天时恢复正常。在脊髓前角,实验组和假手术组CGRP mRNA和蛋白质的表达差异没有显著性(9>0.05)。(4).结扎后1天坐骨神经结扎近端CGRP大量堆积,至14天基本消失;结扎远端坐骨神经内NGF大量堆积,持续到28天仍高于正常。
结论:(1).坐骨神经结扎可导致DRG和脊髓后角的CGRP表达呈现特定的时空模式;(2).CGRP在DRG内的表达下调可能与靶源性神经营养因子的逆行运输障碍有关。