论文部分内容阅读
弓形虫是一种胞内寄生的人畜共患寄生虫。先天性弓形虫病是一种原发性感染,与胎儿患有颅内钙化、脑积水、发育迟缓或其他神经缺陷病密切相关。弓形虫流行病学调查表明在719个孕妇中,约有213个人感染过弓形虫病。在世界范围内,约有1/3的人患有此类疾病,而我国人均感染率为10%~47.3%。而在猪的生产养殖中,弓形虫病的临床症状与其他病毒十分相像,容易出现误诊,给畜牧业生产造成巨大的损失,因此早期检测、预防和鉴别此类疾病尤为重要。弓形虫在宿主体内主要分为三个时期,即速殖子、缓殖子和子孢子时期。不同阶段蛋白质谱表达存在巨大的差异,往往造成漏检,这对弓形虫的预防与治疗造成了严重的阻碍。目前国内检测弓形虫感染的免疫技术有很多种,以病原学检查、免疫学检测等技术为主,虽然检测弓形虫的病原学检测方法有诸多优点,但由于成本高并且操作复杂,对人体有一定的副作用,所以并不适宜推广。酶联免疫吸附实验是目前国内最常用的检测方法之一,具有操作简便、成本低和灵敏性高等特点。本研究通过纯化的弓形虫His标签重组蛋白质MIC3(分泌型蛋白)、SAG1(速殖子特异性蛋白)和BAG1(缓殖子特异性蛋白)作为弓形虫诊断抗原,应用ELISA方法分别对1166份人血清样品进行检测,发现不同诊断抗原对同一批样品检测结果存在差异,检出率由高到低的顺序为BAG1:10.5%(123/1166)、SAG1:5.6%(65/1166)、MIC3:5.5%(63/1166),三种抗原共检出弓形虫阳性血清总数为153份,总阳性率为13.12%(153/1166)。为进一步验证三种抗原检测的准确性,本研究采用了弓形虫感染诊断金标准—MAT方法对1166份样本进行了复检,结果发现279份血清呈阳性。这表明联合抗原通过间接ELISA的方法仍存在漏检现象。综上所述,三种抗原联合ELISA检测,虽不能完全检测出人群中隐性弓形虫感染,但相比于单一抗原检测的漏检率更低。为进一步准确、特异性地通过ELISA方法检测人群中弓形虫隐性感染提出理论依据。