背景:高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)是一组由于遗传性和获得性引起尿酸排泄减少和(或)体内嘌呤代谢障碍,从而导致体内血尿酸增高的疾病。高尿酸血症发病率逐年增长,男性的发病率高于女性。大量的研究证明,高尿酸血症不仅会引起痛风等疾病,还与高血压、糖尿病、心血管疾病、肾脏疾病等疾病的发生发展密切相关。高尿酸血症在现代医学临床治疗中多用别嘌呤、苯溴马隆等药物,这些药物的临床副作用良多,部分药物甚至危及生命。临床上新型的可替代别嘌醇等传统药物的新型药物如Ulodesine等,虽然毒副作用降低了,但是很多药物价格昂贵,因其新上市该药物长期使用的安全性也未知。而我国传统中药价格低廉、毒副作用少、疗效显著,传统中药及中药复方治疗高尿酸血症在临床上已经取得不少的成功,有着多靶点、安全等不可替代的优势。通过我们的前期研究发现,薏仁降浊汤能通过抑制尿酸盐的产生而减少因尿酸盐所引起的大鼠足肿胀,降低血清尿酸浓度、改善足踝关节滑膜组织的病理改变,对大鼠急性痛风性关节炎有显著的作用。薏仁降浊汤的加减方降酸灵能显著降低高尿酸血症大鼠血清尿酸水平,且能降低尿素氮和血清肌酐水平,对肾损伤具有减缓作用,但其潜在机制尚未十分明确。为进一步研究开发降尿酸药物,在根据多年临床经验总结和前期实验研究后,在古方的基础上改良薏仁降浊汤和降酸灵得到薏仁木瓜化浊汤。薏仁木瓜化浊汤在临床应用上降尿酸效果明显,但其可能存在的机制尚未明确。本实验用氧嗪酸钾联合次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,研究薏仁木瓜化浊汤对模型小鼠的降尿酸作用及其机制研究。目的:本课题从体内药理实验、体外酶实验、体外细胞模型实验三个角度出发,研究薏仁木瓜化浊汤降尿酸作用及其机制,为中医药防治高尿酸血症提供研究基础,为薏仁木瓜化浊汤的开发研究提供理论基础。方法:1.雄性昆明小鼠66只,适应性喂养三天后,留11只作为空白组,其他55只灌胃氧嗪酸钾联合次黄嘌呤复制小鼠高尿酸血症模型,造模成功后随机分成别嘌醇组、模型组、薏仁木瓜化浊汤高剂量组、薏仁木瓜化浊汤中剂量组、薏仁木瓜化浊汤低剂量组5组,分别给予4周的灌胃干预。实验结束后对小鼠体重进行称量并麻醉取血并颈椎脱臼处死小鼠后解剖取小鼠内脏,对内脏进行称量并进行分装。取血清和部分肝脏用于生化试剂盒检测,检测小鼠血清中血尿酸(HUA)、肌酐(Cr)、血清尿素氮(BUN)、黄嘌呤氧化酶(XOD)水平以及肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)水平;取部分肝脏和肾脏进行石蜡切片并染色观察肾脏和肝脏情况;取部分肾脏和小肠用于免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测尿酸代谢相关的URAT1、UAT、OAT4、ABCG2等基因的mRNA表达水平和蛋白表达水平。2.用腺苷诱导建立肾HK-2细胞高尿酸模型,CCK-8法确定薏仁木瓜化浊汤、薏仁、木瓜、土茯苓的给药剂量;应用Q-PCR检测URAT1mRNA表达水平变化。3.采用紫外分光光度计测定薏仁木瓜化浊汤对体外黄嘌呤氧化酶的抑制作用。结果:1.模型小鼠的SUA、Cr、BUN、血清XOD、肝脏XOD等值均显著高于空白组小鼠,高尿酸血症小鼠模型构建成功。2.中药复方干预28天后,和模型组相比,薏仁木瓜化浊汤可显著降低小鼠的SUA、Cr、BUN、血清XOD、肝脏XOD水平。3.薏仁木瓜化浊汤能减缓高尿酸水平引起的肝脏、肾脏损伤。4.与模型组相比,薏仁木瓜化浊汤能显著下调炎症因子TNF-ɑ、IL-6水平,降低炎症反应。5.与模型组相比,薏仁木瓜化浊汤可显著升高小鼠肾脏ABCG2、UAT的表达,降低URAT1、OAT4的表达,上调小鼠肠道ABCG2的表达,促进尿酸排泄,减少尿酸重吸收,从而调节尿酸代谢,达到降低尿酸的作用。6.薏仁木瓜化浊汤对体外黄嘌呤酶具有明显的抑制作用,通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性,减少尿酸生成,降低机体尿酸水平。7.薏仁木瓜化浊汤下调细胞高尿酸血症模型中HK-2细胞的URAT1表达,减少尿酸重吸收,降低细胞尿酸水平。结论:1.薏仁木瓜化浊汤能显著降低机体尿酸水平,其机制可能与其能能调节URAT1、OAT4、ABCG2、UAT的表达、抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关。2.薏仁木瓜化浊汤能减缓肝脏、肾脏损伤,其机制可能和其能降低炎症因子TNF-ɑ、IL-6水平、降低机体肌酐水平相关。