论文部分内容阅读
大扁杏(Prunus armeniaca Linn.)是近年来在我国北方推广栽植的以龙王帽、优一、白玉扁、一窝蜂等优良品系为主的甜仁杏品种。目前主要通过嫁接方法繁殖。国内外仅有少量有关大扁杏组织培养研究的报道。本文通过对大扁杏组培过程中影响无菌材料建立、茎段增殖培养及愈伤组织诱导关键因素的研究,旨在为建立适合大扁杏离体快繁、基因保存、遗传转化技术体系奠定基础。具体结果如下: 1.外植体的最佳采取时间以5月为宜,表面消毒采用0.1%HgCl2两次3min的间歇性消毒方法较好。 2.茎段起始培养选用高盐培养基MS好于中盐和低盐培养基,其上增殖芽数较多,茎芽高生长明显。 3.增殖培养时添加低浓度6-BA(0.2~1.0mg/1)对芽的增殖生长有利,6-BA为0.8~1.0mg/L时,茎芽数可达5.9个。添加低浓度的KT(0.1~0.8 mg/L)对茎芽增殖没有影响,超过1.2mg/L时诱导出大量的愈伤组织。 4.改良的MS培养基中,N、K、Cl的含量分别为840、391、105 mg/L时,大扁杏茎芽增殖数最大,茎芽伸长生长最高 5.在MS培养基和改良MS培养基中同时添加不同浓度的6-BA和IBA,对茎芽增殖和伸长生长的影响效果不同。当6-BA和IBA浓度分别为1.0mg/L、0.08 mg/L时,茎芽增殖和伸长生长均达到最大,但改良MS培养基明显好于MS培养基。 6.改良MS培养基中NO3-/NH4+比值为1.4时,芽增殖、伸长生长较好;当NO3-/NH4+比值为0.7时,茎芽数增加而伸长生长被抑制;当NO3-/NH4+为2.8时,茎芽数减少而伸长生长有所增加,茎芽生长势弱。 7.在改良MS培养基中添加1.0~2.0 mg/l的GA3对茎的伸长有明显的促进作用,当超过2.0 mg/l时,茎芽生长弱,不利于继代培养。 8.叶片愈伤组织诱导最佳的叶龄是完全展开的幼叶,愈伤组织的诱导率最高可达87%,质密色绿;叶片中轴近叶柄的部位诱导率最高;在MS培养基上添加1.0-1.5mg/L的2,4-D或1.5-2.0mg/L KT,愈伤组织诱导率高,生长好。