大血藤总酚酸对大、小鼠脑缺血再灌注模型的干预研究

来源 :河南中医药大学 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxw2yanzi
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目的:观察大血藤总酚酸对实验动物脑匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞间粘附分子(ICAM-1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),血清中神经元烯醇化酶(NSE)水平的影响;观察核转录因子(NF-κBp65)、神经生长因子(NGF)的表达情况,以及对脑膜微循环的影响,对神经功能缺失评分、脑梗死面积和脑组织形态学的影响,从而探讨大血藤总酚酸对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法:小鼠反复脑缺血再灌注模型采用双侧颈总动脉阻断血流十分钟,恢复灌流十分钟,再次阻断十分钟的方法。大、中、小剂量大血藤总酚酸组、尼莫地平组及脑络通组分别灌胃相应药物,同时给予假手术组、模型组同体积生理盐水,给药持续7天,每天1次,最后一次给药1h后手术造模,24h后取脑组织,测定小鼠脑组织中IL-6、IL-10、TNF-α水平,测定血清NSE水平,观察脑组织形态学改变。小鼠脑膜微循环采用Perimed仪器,观察小鼠脑平均灌注量的变化。大、中、小剂量大血藤总酚酸组、尼莫地平组及脑络通组分别给予相应药物,假手术组、模型组灌胃同体积生理盐水,连续给药7天,每天1次。末次给药1h后小鼠用10%水合氯醛麻醉(0.03ml/10g),俯卧位固定,观察小鼠双侧颈总动脉结扎前后(假手术组只分离双侧颈总动脉,不做结扎处理)脑平均灌注量的变化。以线栓造大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。尼莫地平组、脑络通组、大、中、小剂量大血藤总酚酸组分别给予相应药物,假手术组、模型组灌胃同体积生理盐水,连续给药7天,每天1次。最后一次给药1h后手术造模,再灌注22h后对大鼠进行神经功能缺失评分,测定脑匀浆中IL-1β、ICAM-1、IL-6、SOD、TNF-α、Bcl-2、ATP酶、Bax、Casp-3、MDA水平;TTC染色脑组织,拍照并计算梗死面积,HE染色观察脑部海马区及皮质区组织病理变化;观察NF-κBp65、NGF免疫组化表达;结果:大血藤总酚酸对小鼠反复脑缺血再灌注模型的影响实验结果提示大血藤总酚酸各剂量组可降低小鼠死亡率、降低脑组织中IL-6、TNF-α水平和血清NSE水平,升高脑组织中IL-10水平,改善脑部海马和皮质区病理损伤。大血藤总酚酸对小鼠脑膜微循环的影响实验结果提示大血藤总酚酸各剂量组对动物脑膜微循环平均灌注量下降有拮抗作用。大血藤总酚酸对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的影响实验结果提示大血藤总酚酸各剂量组可以降低动物神经功能缺失评分、死亡率、脑梗死面积百分比,降低脑组织中IL-6、IL-1β、ICAM-1、TNF-α、MDA、Bax、Caspase-3水平,升高脑组织中SOD、ATP酶、Bcl-2水平,促进脑组织NGF阳性表达,抑制脑组织NF-KBp65阳性表达。改善脑部海马和皮质区病理损伤。结论:以上各实验结果提示:大血藤总酚酸可通过改善脑组织能量代谢,保护脑组织免受炎症因子的损伤,增加神经细胞营养因子保护神经元,减少神经细胞的凋亡,激活脑细胞自我保护,改善大脑皮质及海马区的病变情况,减少脑梗死面积等作用,减少脑缺血再灌注损伤,起到对脑组织的保护作用。
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