矮秆波兰小麦重金属转运基因TpNRAMPs的克隆和表达分析

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuehaoyou123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
自然抗性相关巨噬细胞蛋白家族(Natural resistance-associated macrophage proteins,NRAMP)是一类高度保守的跨膜蛋白,广泛存在于原生生物、真菌、植物和动物中。该家族最早在小鼠体内发现(Nramp1),控制小鼠体内寄生虫感染自然抗性。拟南芥(Arbidopsis thaliana)和水稻(Oryza stativa)等植物中的NRAMP基因参与植物体重金属吸收、转运以及再分布,维持植物体内金属平衡;同时,NRAMP家族还同植物抗性相关。至今,已在拟南芥和水稻中分别发现6个和7个NRAMP基因,理论上小麦中也应该含有NRAMP基因,然而该家族在小麦中鲜有报道。  波兰小麦(2n=4x=28,AABB,Triticum polonicum)是禾本科小麦属重要的四倍体二粒栽培小麦,是普通小麦遗传改良的重要种质资源。波兰小麦可能是伊斯帕罕小麦(2n=4x=28,AABB,T.ispahanicum)与硬粒小麦(2n=4x=28,AABB,T.durum)的杂种,同普通小麦及其余四倍体小麦的遗传相似性较低。矮秆波兰小麦是在我国新疆地区发现的具有矮秆性状的波兰小麦,具有株高矮化、长穗等一系列性状。矮秆波兰小麦能积累较高含量的镉和锌,但其原理未知。NRAMP作为重金属元素转运蛋白,在植物体耐重金属胁迫方面具有重要的作用。本实验旨在分离鉴定矮秆波兰小麦中的NRAMP基因,并通过qRT-PCR初步分析矮秆波兰小麦NRAMP在重金属处理下表达模式的变化,从而丰富对植物NRAMP转运蛋白家族的认识,为小麦重金属遗传修饰奠定基础和提供依据。  本研究利用矮秆波兰小麦转录组数据库,筛选获得4条编码序列完整的NRAMP序列,以此作为参考序列设计引物,从矮秆波兰小麦的根和叶中进行克隆,同时利用qRT-PCR对TpNRAMPs在7种不同重金属元素处理下基因表达情况进行了分析。主要结果如下:  1.矮秆波兰小麦具有较强的耐金属属性。金属处理24小时后,矮秆波兰小麦的根和叶片均积累了大量的金属元素。其中铜含量最高,分别达到了125.88 mg/g和38.53mg/g,但同时也影响了植株的生长。此外,根和叶片也积累了高含量的镉、锌和铁等元素,但植株生长没有受到影响,表明矮秆波兰小麦具有一定的耐金属属性。  2.克隆获得5条矮秆波兰小麦TpNRAMPs基因序列,分别命名为TpNRAMP2.1、TpNRAMP2.2、TpNRAMP、TpNRAMP和TpNRAMP6。同时,小麦基因组序列信息比对获得了普通小麦的TaNRAMP1、TaNRAMP7及一未命名的TaNRAMP基因,从而确定小麦具有7个或7个以上NRAMP基因。  3.在不同金属胁迫下,TpRAMP2.1、TpNRAMP3、TpNRAMP和TpNRAMP6的表达模式变化不同,表现出不同的金属敏感性,可能具有不同的金属吸收和转运的能力。TpNRAMP2.1在矮秆波兰小麦的根部对镁、铁和铜最敏感;在叶片中,对镁和锌最敏感。其次,TpNRAMP3在根部对铁、铜和镉最敏感且其表达量均显著提高;在叶片中,TpNRAMP3对镉无反应。第三,TpNRAMP5在根部对铁和锌最敏感;在叶片中,对镉的敏感性最高。最后,TpNRAMP6在根部对铁最敏感,而对铅无反应;在叶片中,对镁和锌最敏感。同时,这4个基因在矮秆波兰小麦的根部对铁均表现出最强的敏感性。
其他文献
  地质资料是不可再生的企业宝贵信息资源,越来越多的企业对其进行了更多的保护。但是,在日常的地质资料归档工作中,仍存在着一些习惯性管理漏洞。本文通过对地质资料归档工作
以无脊椎动物为主的土壤动物和微生物群落是生态系统物质循环与能量转换的积极参与者,在凋落物分解中具有不可替代的作用。因此,理解凋落物分解过程中无脊椎动物和微生物群落
路基是公路工程的基础。我国地域广阔,随着工程建设越来越多,复杂地质情况上的路基问题也就更加突出。工程实践中往往就会遇到许多如地下水位较高或遭遇降雨较多的特殊的工程路
我国的水能资源开发利用不到25%,很多蕴藏在深山峻岭的水力资源未得以充分利用,进一步利用好丰富的水能资源是中国能源政策的必然选择。而随着水电资源的深入开发,电站的地质条件
  本文针对贵州省地质资料汇交工作,在地质勘查单位进行问卷调查,从《地质资料管理条例》、《地质资料管理条例实施办法》的贯彻、汇交人必须履行汇交义务、掌握成果地质资料
  通过分析地质资料汇交过程中存在的问题,提出应将地质资料汇交工作纳入项目进程中,并应充分前置,在项目初始阶段就要给予足够的重视,要对资料汇交工作进行详细说明,便于后续工
  本文针对非结构化数据管理中存在的问题,分析了西南油气田地质档案非结构化数据管理特点,提出了数据采集、数据存储、数据管理与数据利用的技术架构,并对非结构化数据的管理
氨基脲敏感型胺氧化酶(Semicarbazide-sensitive amine oxidase, SSAO; EC1.4.3.6)是一组含铜胺氧化酶的统称,广泛分布于器官和组织中,尤其在脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌
  本文介绍了中石化西南油气分公司荣誉档案的管理现状以及管理措施,阐述了企业荣誉档案作为档案的一个重要组成部分,在对外经济合作、个人技能鉴定、职称晋升和在构建企业文
  在档案事业迅猛发展的今天,随着双百亿油气田建设目标的推进,勘探项目的迅速增加,应归档资料数量和类别成倍增长,如何做好新时期资料接收业务工作,如何做好进馆资料的监督和指