目的:本研究在课题组前期成果以及AD病理机制探索的现代研究基础上建立脾气虚证认知障碍大鼠模型,从模糊数学、行为学和病理学等层面对模型进行评价。分别设立中药和西药治疗组对模型大鼠进行治疗,通过检测用药前后大鼠脑组织中的炎症因子水平、脂质过氧化产物含量、氧化酶活性、以及TLR4/My D88/NF-κB炎症通路上关键靶点分子的表达,从脾失健运的角度探讨益气健脾法对改善认知障碍大鼠神经炎症和过氧化损伤的作用,为中医益气健脾为原则治疗认知障碍疾病提供理论依据。材料与方法:选用2～3月龄的SPF级健康SD大鼠共60只,雌雄各30只,随机分为正常对照组、脾气虚证认知障碍模型组、阳性药物对照组和益气健脾益智方组。采用饮食不节+劳累过度的复合手法复制脾气虚证大鼠模型,在此基础上再通过Aβ1-42海马注射建立脾气虚证认知障碍模型,通过模糊数学方法、水迷宫行为测验和病理学观察等方法对模型进行评价。分别用益气健脾益智方和安理申连续灌胃治疗4周,结束后取大鼠全脑及海马组织。用相应试剂盒检测大鼠脑组织中TNF-α、IL-6、MDA、SOD等炎症和氧化应激指标水平,用Western Blot和实时荧光定量PCR分别检测大鼠脑组织中TLR4、My D88、NF-κB的蛋白表达和mRNA表达水平。结果:1大鼠体重、食量变化情况:造模期间,与正常组相比,造模组(指模型组、西药组、中药组,下同)大鼠的体重和食量增幅均表现为降低;治疗期间,与模型组相比,西药组、中药组大鼠体重和食量增幅均表现为升高。2大鼠行为学检测结果:定位航行训练结果显示,造模组的逃避潜伏期相比于正常组日渐增加;空间探索实验结果显示,造模组平台象限活动时间占比、平台区域穿越次数明显少于正常组(P<0.01),首次抵达平台区域耗时则明显多于正常组(P<0.01)。3大鼠脑组织病理学检测结果:大鼠脑海马区经HE染色后,其中正常组大鼠神经元排列规整、数量较多、染色均匀,细胞核呈类圆形,核仁清楚。模型组大鼠神经锥体细胞数量减少、排列紊乱、间隙增宽,胞核深染,胞浆皱缩,大量胶质细胞增生,周围组织形成水肿。与模型组相比,西药和中药组大鼠经给药治疗后的组织形态均明显恢复,细胞数量增加,排列更为规律,核染相对清晰,胶质细胞增生程度也明显好转。4大鼠脑组织炎症与氧化应激指标检测结果:模型组大鼠脑组织中TNF-α、IL-6、MDA含量与正常组相比均显著提高(P<0.01),SOD活性显著下降(P<0.01);与模型组比较,西药组、中药组的TNF-α、IL-6、MDA含量均明显下降(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01)。5大鼠脑组织中TLR4、My D88、NF-κB蛋白表达检测结果:Western Blot检测结果显示,与正常组比较,模型组TLR4、My D88、NF-κB的蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组和中药组TLR4、My D88、NF-κB的蛋白表达水平均不同程度下降(P<0.01)。6大鼠脑组织中TLR4、My D88、NF-κB mRNA表达检测结果:实时荧光定量PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组TLR4、My D88、NF-κB的mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组和中药组TLR4、My D88、NF-κB的mRNA表达水平均不同程度下降(P<0.01)。结论:1脾气虚证认知障碍大鼠的脑细胞结构、数量和排列等发生了改变,构成了脾气虚证认知障碍发生的病理学基础。2脾气虚证认知障碍大鼠脑内神经炎症反应和氧化应激反应被持续激活,导致大量炎性因子和氧自由基产生,促使神经细胞变性、淀粉样蛋白生成并沉积,此过程参与了脾气虚证认知障碍的现代医学发病机制。3脾气亏虚作为认知障碍的中医病机之一,促进了认知障碍大鼠脑内炎症反应和脂质过氧化损伤。以益气健脾法治疗可以调节TLR4/My D88/NF-κB信号通路的活跃程度,减轻认知障碍大鼠脑内的炎症反应和过氧化损伤,延缓认知障碍的病变过程。