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一.大鼠牙槽骨骨质疏松模型的探讨。目的:比较去卵巢、去睾丸及糖皮质激素对大鼠牙槽骨骨量的影响,探讨牙槽骨骨质疏松动物模型,为防治牙槽骨骨质疏松的药物研究提供合适的模型。
方法:1.去睾丸模型:雄性6月龄大鼠24只,体重(468±30)g,随机分为3组。除对照(Con)组外,其余行双侧睾丸摘除术。Con组和去睾丸(ORX)组给予溶媒5ml/kg/d灌胃,丙酸睾丸酮(TP)组给予丙酸睾丸酮5mg/kg/d灌胃,共12周。
2.糖皮质激素模型:雄性6月龄大鼠16只,体重(468±30)g,随机分为2组。对照(Con)组给予溶媒5ml/kg/d灌胃,激素(GC)组给予泼尼松2.7mg/kg/d灌胃,共12周。
3.去卵巢模型:雌性6月龄大鼠24只,体重(299±20)g,随机分为3组。除对照(Con)组外,其余行双侧卵巢切除术。Con组和去卵巢(OVX)组给予溶媒5ml/kg/d灌胃,雌激素(EE)组给予炔雌醇100μg/kg/d灌胃,共12周。
以上所用大鼠均为SPF级SD大鼠。造模90天后处死,取下颌牙槽骨,脱钙,HE染色,用骨形态计量学方法检测牙槽骨骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、厚度(Tb.Th)、数量(Tb.N)及分离度(Tb.Sp)。
结论:去除双侧睾丸或大量应用糖皮质激素,大鼠牙槽骨丢失不明显;而去除双侧卵巢后大鼠牙槽骨丢失显著,因此可用去除卵巢的方法制备牙槽骨骨质疏松动物模型。
二.丹参对去卵巢大鼠牙槽骨骨质疏松的防治作用。目的:探讨丹参及其有效成分对去卵巢大鼠牙槽骨骨质疏松的防治作用及其可能机制。
方法:雌性大鼠64只,体重(299±20)g,随机分为8组。除对照(Con)组外,其余行双侧卵巢切除术。Con组和去卵巢(OVX)组给予溶媒5ml/kg/d灌胃;雌激素(EE)组给予炔雌醇100μg/kg/d灌胃;低(L-DWE)、中(M-DWE)和高(H-DWE)剂量丹参水提物组分别给予丹参水提物2.5g/kg/d、5.0g/kg/d和10.0g/kg/d灌胃;丹参素(Tanl)组给予丹参素12.5mg/kg/d灌胃;丹参酮(Tane)组给予丹参酮200mg/kg/d灌胃。
12周后取大鼠牙槽骨,用骨形态计量学方法检测牙槽骨骨形态计量学静态参数,组织化学染色法检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和碱性磷酸酶(AKP)活性,免疫组化法检测胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达水平。
结论:1.中剂量丹参水提物、丹参素和丹参酮均能有效对抗去卵巢大鼠牙槽骨丢失,丹参水提物疗效不及雌激素,丹参素和丹参酮疗效与雌激素相当。
2.中剂量丹参水提物、丹参素和丹参酮能对抗去卵巢大鼠牙槽骨丢失的可能机制分别是:增加牙槽骨IGF-Ⅰ分泌和降低破骨细胞的活性;增加牙槽骨IGF-Ⅰ分泌;增加牙槽骨成骨细胞活性。