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目的：构建可经四环素调控的重组凋亡素基因逆转录病毒载体，观察受四环素调控的凋亡素基因的表达对人肝癌细胞的影响。 方法：将凋亡素基因克隆入逆转录病毒质粒载体pRevTRE，构建出重组载体pRevTRE-VP3。质粒载体pRevTet-Off、pRevTRE-VP3以磷酸钙共沉淀法分别转染PT67包装细胞，经抗生素筛选及病毒滴度测定选取稳定产病毒的包装细胞株PT67/Off和PT67/VP3。取PT67/Off和PT67/VP3细胞病毒上清液依次感染人肝癌细胞系HepG2，用抗生素筛选出抗性细胞株HepG2/Off-VP3。通过向培养液中加入或去除四环素调控凋亡素基因在HepG2/Off-VP3细胞中的表达，Annexin V-FITC/PI双染色后，以流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果：经酶切和测序鉴定，凋亡素基因被正确克隆到逆转录病毒载体pRevTRE；筛选出稳定产病毒的包装细胞株PT67/Off和PT67/VP3，其病毒滴度分别为1×10~4cfu/ml和3×10~4cfu/ml；获得可经四环素调控凋亡素基因表达的人肝癌细胞株HepG2/Off-VP3-8，经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合于HepG2/Off-VP3-8细胞DNA，并得到了表达；HepG2/Off-VP3-8细胞在无四环素培养环境中培养24小时、48小时和72小时凋亡率明显高于在1μg/ml四环素环境中相同时间点的细胞凋亡率，两者差异有显著性。 结论：(1)成功构建了可调控凋亡素基因表达的重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3；(2)凋亡素基因经RevTet系统导入人肝癌细胞HepG2后，在四环素调控下表达凋亡素并诱导HepG2细胞凋亡。